商品介紹:
Pymetrozine是同翅類(lèi)的飼養(yǎng)抑制劑,可防止蚜蟲(chóng)種Mysus persicae(Sulzer)傳播花椰菜馬鈴薯毛霉病毒。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):123312-89-0 別名:CGA 215944 純度:99.89% 分子量:217.23 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
甜橙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hyaluronic Acid 血紅氧合2抗體包裝5g
甜瓜蒂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hyaluronic Acid HOXc8抗體包裝1g
甜菊苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hyaluronic Acid 原癌基因H-ras抗體包裝5g
甜葉菊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hyaluronic Acid 熱休克蛋白-60抗體包裝1g
鐵冬青;毛冬青(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hyaluronic Acid 熱休克蛋白-70抗體包裝25g
鐵筷子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ropivacaine base熱休克蛋白90α抗體包裝5g
鐵皮石斛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ropivacaine base熱休克蛋白90β/HSP90 β 抗體包裝100g
鐵掃帚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gossypol-acetic acid人巨病UL23抗體包裝25g
鐵莧菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: CatalaseHECA蛋白抗體包裝1g
葶藶子(播娘蒿)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tazobactam Acid異質(zhì)核糖核蛋白hnRNPA2抗體包裝250mg
葶藶子(獨(dú)行菜)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tazobactam Acid異質(zhì)核糖核蛋白U抗體包裝5g
通關(guān)藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: β-Nicotinamide adenine dinucleotide hydrate(β-NAD)人類(lèi)狀瘤病16/18 E6抗體包裝250mg
通關(guān)藤苷G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: β-Nicotinamide adenine dinucleotideHA tag標(biāo)簽抗體包裝25g
通關(guān)藤苷H(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: β-NADP荷爾蒙敏感脂肪抗體包裝5g
通關(guān)藤苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Guanine HCl血紅蛋白α1/α-Globin抗體包裝1g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR膜結(jié)合型IgM試劑盒蓮心堿高鹽;Liensinine p
副凝聚短狀桿菌Brachybacterium│paraconglomeratum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品膜攻擊復(fù)合物試劑盒羅通定;Rotundine
馬鏈球菌馬亞種Streptococcus│egui subsp.equi 質(zhì)量規(guī)格:>98%膜輔蛋白試劑盒洛伐他汀;Lovastatin
同翅類(lèi)飼養(yǎng)抑制劑(Pymetrozine)乙二腦病蛋白抗體26-脫氧升麻苷 3-AT
轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體28-O-順芷酰匙羹藤新苷元 Sodium phosphate, tribasic, dodecahydrate
轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體28-去-β-香樹(shù)脂 Sodium phosphate, dibasic, anhydrous
DNA切除修復(fù)蛋白1抗體28-去-β-香樹(shù)脂(標(biāo)準(zhǔn)品) Ferrozine
轉(zhuǎn)錄因子E2F6抗體2’-乙酰毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium acetate, trihydrate
膠質(zhì)谷運(yùn)載蛋白2抗體2"-O-沒(méi)食子酰金絲桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Thidiazuron
膠質(zhì)谷運(yùn)載蛋白3抗體(神經(jīng)/上皮谷運(yùn)載蛋白)3"-O-表沒(méi)食子兒茶沒(méi)食子酯 Iodine
內(nèi)皮轉(zhuǎn)化2抗體3',4',5',5,7-五氧黃(標(biāo)準(zhǔn)品) ADA, Alcohol dehydrogenase
嗜性粒陽(yáng)離子蛋白抗體3',4',7-三羥黃(標(biāo)準(zhǔn)品) Tween-80