產(chǎn)品屬性:
中文名稱:GSK-3β抑制劑(TDZD-8)
英文名稱:TDZD-8
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
TDZD-8是GSK-3β的抑制劑,IC50為2μM;對Cdk-1/cyclin?B,CK-II,PKA和PKC的作用較弱,IC50值均>100μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:327036-89-5 別名:GSK-3β Inhibitor I;NP 01139 純度:99.07% 分子量:222.26 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
玫瑰暗黃鏈霉菌小鼠甲基化Anti-SEPTIN14 Antibody人補體1q(C1q)
木賊鐮孢人抗肝膜抗體Anti-SEPHS2 Antibody人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)
土壤短波單胞菌大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物Anti-SENP8 Antibody人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)
球孢白僵菌小鼠抗增殖核抗原抗體Anti-SEPTIN1 Antibody人α1(Thymosin α1)
熒光假單胞菌大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白Anti-SEPTIN2 Antibody人α1(Thymosin α1)
解脂假絲酵母解脂變種人抗肝特異性脂蛋白抗體Anti-SEPTIN3 Antibody人補體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)
谷棒桿菌人抗眼肌抗體Anti-SEPTIN3 Antibody人補體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)
微白黃鏈霉菌大鼠血小板衍生生長因子Anti-SEPTIN7 Antibody人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)
奧斯陸莫氏菌小鼠脂蛋白脂Anti-SEPTIN6 Antibody人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)
暗產(chǎn)色鏈霉菌小鼠抗性磷5bAnti-SEPTIN8 Antibody人類白抗原C(HLA-C)
南方正青霉大鼠氧化低密度脂蛋白Anti-SEPTIN8 Antibody人類白抗原C(HLA-C)
食戴爾福特菌人抗補體1q抗體Anti-SEPTIN7 Antibody人類白抗原E(HLA-E)
薛瓦酵母人抗內(nèi)因子抗體Anti-SEPTIN7 Antibody人類白抗原E(HLA-E)
甜菜假單胞菌小鼠葡萄糖依賴性胰島釋放多肽Anti-SERGEF Antibody人類白抗原A(HLA-A)
蘇云金芽胞桿菌鲇澤變種大鼠血小板活化因子Anti-SERINC1 Antibody人類白抗原A(HLA-A)
黑曲霉大鼠Ⅲ型前膠原基端肽Anti-SERINC2 Antibody人血清淀粉樣蛋白P(SAP)
核轉(zhuǎn)錄因子25抗體蘇云金芽孢桿菌多窩亞種6H8/4F7
跨膜蛋白132A抗體#銅綠假單孢CT-1G7
四聚體多肽蛋白21B抗體松乳菇(無法提供)C9D11
TEX261蛋白抗體小麥全蝕病4A10
GSK-3β抑制劑(TDZD-8)杰丁塞伯林德納氏酵母 3,5-二-L-酪
副豬嗜血桿 7,2’-二羥基-3’,4’-二甲氧基-異黃烷-7-O-β-D-葡萄糖苷;2’-羥基- 3’,4’-
駒形德克斯酵母 3,5-二溴-L-酪
日本擬無枝酸 DL-酪
冷育噬胞 7,2'-二羥基-3',4-二甲氧基異黃烷
根瘤 D-酪
土星形青霉 寶藿苷II;大花羊藿苷A;意瑞苷A
釀酒酵母 L-酪
橢孢青霉 巨大戟-3,4:5,20-雙縮酮
小馬勃 5-羥色酸
蘇云金芽胞桿庫爾斯塔克亞種 BOC-L-色
Pantoea rodasii 巨大戟-5,20-縮酮-3-當(dāng)歸酸酯
暗黑鏈霉 DL-色
奧氏蜜環(huán) 巨大戟-5,20-縮酮
呂氏泰勒蟲(青海共和株) D-色
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)