KSP(HsEg5)特異性抑制劑(Ispinesib)

KSP(HsEg5)特異性抑制劑(Ispinesib)公司*的產(chǎn)品：AIF/FITC 熒光標(biāo)記AIF抗體IgG對(duì)氨苯磺 PT，99.9-100.1%
AIF/FITC 熒光標(biāo)記調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體IgG對(duì)氨苯磺 ACS,98.0-102.0%
A/H1N1-M2 Human/Gold 膠體金標(biāo)記兔抗人A型流感病H1N1-M2抗體IgG焦鈉 AR,99.0%
A/H1N1-M2 Human/

 

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：KSP(HsEg5)特異性抑制劑(Ispinesib)

英文名稱：Ispinesib

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

志賀氏菌癌易感基因2抗原Anti-CALB2 AntibodySynerginγ蛋白(SYNRγ)

阿爾放線菌多孢菌蛋白酪磷-1B（抗原）Anti-CALHM1 AntibodySynembrynB蛋白(SYNB)

大腸埃希氏菌維甲受體-α 多肽Anti-CALB1 AntibodySynembryn蛋白(SYN)

華鏈霉菌風(fēng)疹病糖蛋白多肽片段Anti-CALR AntibodySyncollin蛋白(SYCN)

巨型艾耳球蟲突觸相關(guān)蛋白-1（多肽抗原）Anti-CaMK1-alpha AntibodySurfeit6蛋白(SURF6)

微小小單胞菌Anti-CAMK2A AntibodySurfeit4蛋白(SURF4)

淡紫褐鏈霉菌Anti-CAMK2G AntibodySurfeit3蛋白(SURF3)

耐輻射奇球菌膽汁鹽輸出泵蛋白抗原Anti-CAMK2D AntibodySurfeit2蛋白(SURF2)

孤獨(dú)浜本酵母分泌（抗原）Anti-CAMKV AntibodySurfeit1蛋白(SURF1)

球形賴芽孢桿菌分泌受體（抗原）Anti-CAMK4 AntibodySugen激071(SGK071)

約氏不動(dòng)桿菌激信號(hào)-1抑制劑（抗原）Anti-CAND2 AntibodyStrumpellin蛋白(STRUM)

果生鏈核盤菌心肌肌凝蛋白多肽Anti-CAMKV AntibodySRC/FGR/YES相關(guān)FYN癌基因(FYN)

核突觸蛋白（抗原）Anti-CAND1 AntibodySpatial蛋白(C10ORF27)

玉米細(xì)菌性枯萎病菌核突觸蛋白（抗原）Anti-CANX AntibodySPARC樣蛋白1(SPARCL1)

葉點(diǎn)霉屬癌相關(guān)抗原抗原Anti-CANX AntibodySpacemaker蛋白(SPAM)

乳桿菌屬P物質(zhì)受體（抗原）Anti-CAPN10 AntibodySp100核抗原(Sp100)

原鈣粘蛋白γA5抗體Litorimicrobiumtaeanense人滑膜成纖維細(xì)胞

血小板白細(xì)胞C激底物同源結(jié)構(gòu)域M3抗體Loktanellapyoseonensis人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

p400蛋白抗體Maritaleamyrionectae人皮膚黑色瘤細(xì)胞

脈周蛋白1抗體胃癌抗原蛋白Ga50Spongiibactermarinus小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類）
KSP(HsEg5)特異性抑制劑(Ispinesib)基姆斯地青霉 9-O-Feruloyllariciresinol

異常漢遜酵母 9-Hydroxydarutigenol

紫闊鏈霉 8-Lavandulylkaempferol

小鼠巨噬 8-Benzoyl-5,7-dihydroxy-2,2-dime

葡萄球 7-氧代扁柏脂

水棲嗜冷桿 2--1,3-二甲基咪唑鎓六氟磷酸鹽

黃曲霉 7-O-Methylporiol

黑曲霉 6-O-Feruloylglucose

紫紅菇 6-O-咖啡?；芄?/span>

華鏈霉 6-O-(3'',4''-Dimethoxycinnamoyl)

球孢白僵 6-Epi-8-O-acetylharpagide

費(fèi)氏中華根瘤 6-Benzoyl-5,7-dihydroxy-2,2-dime

熒光假單胞生物型F 6-Acetyl-2,2-dimethylchroman-4-o

馬氏內(nèi)孢霉 5''-O-Syringoylkelampayoside A

谷堆白蟻傘 5-Hydroxymethyl-7-methoxybenzofu 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)