FMS/KIT雙重抑制劑(PLX647)

FMS/KIT雙重抑制劑(PLX647)公司*的產(chǎn)品：TrK A.B.C/TrK /FITC 熒光標(biāo)記酪氨激A.B.C抗體IgG
Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC 熒光標(biāo)記化酪氨激A抗體IgG
Trk B/FITC 熒光標(biāo)記酪氨激B抗體IgG
Trk B/FITC 熒光標(biāo)記酪氨激B抗體IgG
Trk C/FITC 熒光標(biāo)記酪氨激C抗

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：FMS/KIT雙重抑制劑(PLX647)

英文名稱：PLX647

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Halobacterium salinarum大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)

串珠鐮孢Alcaligenes faecalis subsp. faecalis大鼠組織多肽抗原(TPA)

白酒紅鏈霉菌Halobacterium salinarum大鼠組織多肽抗原(TPA)

大腸埃希菌Paenibacillus macerans大鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)  

硫磺菌Azotobacter chroococcum大鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)  

釀酒酵母Brevibacillus brevis大鼠組織因子(TF)

芬芳鐮刀菌Bordela bronchissptica大鼠組織因子(TF)

蠟狀芽孢桿菌Lactobacillus fructivorans大鼠維生D(VD)

假單胞菌屬Pediococcus acidilactici大鼠維生D(VD)

大腸桿菌Lactobacillus casei大鼠維生K1(VK1)

尖孢鐮孢Leuconostoc fallax大鼠維生K1(VK1)

植物乳桿菌Lactobacillus rhamnosus大鼠維生B12(VB12)

土曲霉Pediococcus pentosaceus大鼠維生B12(VB12)

粘質(zhì)沙雷氏菌Clostridium sporogenes大鼠維生D3(VD3)

蠟狀芽孢桿菌Lactobacillus zeae大鼠維生D3(VD3)

釀酒酵母Lactobacillus pentosus大鼠維生D2(VD2)

環(huán)指蛋白113A抗體蜜環(huán)菌(榛蘑)青霉屬菌

RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB7抗體黃色白鬼傘溶血鏈球菌

RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB6B抗體松塔牛肝菌絲核菌屬菌種

認(rèn)知缺陷突觸相關(guān)蛋白SynGAP抗體擬鹿角靈芝頭狀鏈霉菌
FMS/KIT雙重抑制劑(PLX647)枯草芽孢桿 β-葡聚糖

類芽孢桿屬 紫蓳靈

白黃側(cè)耳 甲基葡萄糖

奇異球 異鼠李-3-O-新

類馬鏈球 塔格糖

果生鏈核盤 亥茅苷

蒂地盾殼霉 松二糖

黑曲霉 5-羥色酸

南印度站游動球 化矢車菊

釀酒酵母 L-來蘇糖

栗疫 矢車菊-3-O-葡萄糖苷

禾谷鐮刀 D-來蘇糖

高山節(jié)桿 肉堿

扁 N-乙酰-D-甘露糖

枯草芽孢桿 佛手柑內(nèi)酯 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)