ERK1和ERK2抑制劑(LY3214996)

ERK1和ERK2抑制劑(LY3214996)公司*的產(chǎn)品：Phospho-Numb (Ser276)/FITC 熒光標(biāo)記化膜相關(guān)蛋白Numb抗體IgG(+)-2--L-絲氨 99%
NOS-3/eNOS /FITC 熒光標(biāo)記一氧化氮合成-3抗體（內(nèi)皮型）IgGD-烯甘氨 98%
Phospho-eNOS (Thr495)/FITC 熒光標(biāo)記化一氧化氮合成3抗體（內(nèi)皮型）IgG3,3

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：ERK1和ERK2抑制劑(LY3214996)

英文名稱：LY3214996

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

棲砂桿菌人集蛋白亞家族成員11Lysinibacillus sphaericus小鼠解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)

輪蟲弧菌人α1β糖蛋白Lysinibacillus sphaericus小鼠抗(AT)

動(dòng)物乳桿菌人可溶性髓系觸發(fā)受體-1Lysinibacillus sphaericus小鼠抗(AT)

淡紫擬青霉大鼠肌抑 ELISA 試劑盒Lysinibacillus sphaericus小鼠胰島抗體(ICA)

伯頓擬內(nèi)孢霉人黑瘤衍生亮鏈額外核因子Lysinibacillus sphaericus小鼠胰島抗體(ICA)

褐環(huán)粘蓋牛肝菌人二磷尿核苷葡糖基轉(zhuǎn)移2家族肽B4Lysinibacillus sphaericus小鼠腎損傷分子1(Kim-1)

研究團(tuán)隊(duì)谷桿菌人蛋白磷1調(diào)控/抑制因子亞基1ALysinibacillus sphaericus小鼠腎損傷分子1(Kim-1)

噬纖維菌人腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2Lysinibacillus sphaericus小鼠抗單核抗體(AMA)

蘇云金芽孢桿菌人鳥苷解離抑制因子Lysinibacillus sphaericus小鼠抗單核抗體(AMA)

大腸埃希氏菌人八聚體轉(zhuǎn)錄因子Lysinibacillus sphaericus小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)

野油菜黃單胞菌(甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌,野油菜桿菌)人八聚體轉(zhuǎn)錄因子Lysinibacillus sphaericus小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)

香菇人脫氧尿三磷Lysinibacillus sphaericus小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)

亞洲盤孢人協(xié)同激分子受體Lysinibacillus sphaericus小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)

孟氏假單胞菌人肽聚糖Bacillus sporothermodurans小鼠胚胎干系MESPU30(M30)

彩色豆馬勃人脂阿伯甘露聚糖Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠胚胎干系MESPU30(M30)

雜色曲霉人甘露糖Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)

AN1型鋅指蛋白5抗體茶色粘傘菌家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

鋅指蛋白568抗體瓣?duì)铐g革菌豚鼠肋肌成纖維樣細(xì)胞

鋅指蛋白473抗體雷斯青霉BALB/c小鼠胚胎細(xì)胞

鋅指蛋白93抗體銹赤蠟黃鏈霉菌抗鼠CD8單克細(xì)胞系
ERK1和ERK2抑制劑(LY3214996)德氏乳桿保加亞亞種 擬人參皂苷Rh2

膠紅酵母 天青I

脆紅泡囊線黑粉 孕甾烯酮

巴氏醋桿巴氏亞種 天青II

細(xì)鏈格孢 阿樸-12'-番茄紅

豬丹絲 刃天青

銅綠假單胞 健那綠

梨生囊殼孢 大戟因子L1

不等彎孢 13-去羥基印烏堿

蠟狀芽孢桿 新知母皂苷BII

麥芽糖假絲酵母 掌葉防已堿

奇異變形桿 異丹酸B

栗疫 甲基綠

多粘類芽孢桿 大豆皂苷Aa

根瘤 次甲基綠