p38MAP激酶抑制劑（SB 242235）

p38MAP激酶抑制劑（SB 242235）公司正在出售的產(chǎn)品：UCN/FITC 熒光標(biāo)記新型血管活性因子UCN抗體(小鼠、大鼠)IgG
Urocortin 3/FITC 熒光標(biāo)記尿皮質(zhì)UCN3抗體IgG
UCP-1/FITC 熒光標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白1抗體IgG
UCP-2/FITC 熒光標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白2抗體IgG
UCP-3/FITC 熒光標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白3抗體IgG
UG

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
嗜細(xì)小鏈孢菌Bacillus thuringiensis大鼠L解(PAL)

滅癌鏈霉菌Bacillus thuringiensis大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)

沉積物冷彎曲菌Bacillus thuringiensis大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)

綠梭鏈孢Bacillus thuringiensis大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)

麥根腐平臍蠕孢Bacillus thuringiensis大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)

宇佐曲霉Bacillus thuringiensis大鼠干因子受體(SCFR)

淡天藍(lán)鏈霉菌Bacillus thuringiensis大鼠干因子受體(SCFR)

黃空柄牛肝菌Bacillus thuringiensis大鼠基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)

猴頭菇Bacillus thuringiensis大鼠基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)

微小鏈霉菌Bacillus thuringiensis大鼠血管生成受體Tie1(ANG-R-Tie1)

毛地黃殼針孢*Bacillus thuringiensis大鼠血管生成受體Tie1(ANG-R-Tie1)

香菇Bacillus thuringiensis大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪激2(Tie-2)

土星擬威爾酵母subsufficiens變種Bacillus thuringiensis大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪激2(Tie-2)

枯草芽孢桿菌枯草亞種Bacillus thuringiensis大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)

大腸埃希氏菌Bacillus thuringiensis大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)

肉梭菌 C型Bacillus thuringiensis大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)

腫瘤血管內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白Robo4抗體黃褐假單胞菌列克星敦沙門(mén)氏菌

絡(luò)絲蛋白抗體呼吸系統(tǒng)貪銅菌密爾沃基沙門(mén)氏菌

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白p130抗體產(chǎn)黃假單胞菌盧特格爾沙門(mén)氏菌

血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體賽維瓦爾假單胞菌格里沙特沙門(mén)氏菌
p38MAP激酶抑制劑（SB 242235）白僵 獐牙菜苷

米曲霉 DL-蘋(píng)果酸鈣

 重樓皂苷VII

圍小叢殼 山梨酸

海洋黃球形 重樓皂苷VI

吸水鏈霉井崗變種 2--4--α-L-巖藻糖苷

釀酒酵母 鼠尾草

明尼蘇達(dá)被毛孢 重樓皂苷II

紅球 D-葡萄糖酸鈉

香蕉枯萎病4號(hào)小種 重樓皂苷I

米根霉 檸檬酸鈉

Celeribacter 小白菊內(nèi)酯

陶蘭柱擔(dān) 瑞香

毛霉 檸檬酸鈉

Phoma medicaginis var. medicaginis 葫蘆巴堿鹽酸鹽