以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Cabergoline是一種麥角衍生的多巴胺D2亞類(lèi)受體激動(dòng)劑,高親和力作用于D2,D3和5-HT2B受體,Ki分別為0.7,1.5和1.2。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):81409-90-7 別名:FCE-21336 純度:99.47% 分子量:451.6 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
左乙拉西坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Yeast extract腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體包裝1mg
佐米曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sodium carbonate anhydrous硫軟骨蛋白多糖3抗體包裝10g
佐匹克(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Fructose染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1抗體包裝25g
唑來(lái)磷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Riboflavin 5'-monophosphate sodium salt hydrate磷化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體包裝1g
槲皮-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龍膽雙...英文名稱(chēng): EB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/mlETS相關(guān)蛋白71抗體包裝25g
(+)-兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Green-DNA Dye,SYBR Green I外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體包裝5g
(+)-兒茶合物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-GlucoseETV3L蛋白抗體包裝5g
(+)松脂-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Imidazole酪蛋白激受體B6抗體包裝1g
(-)-Holostyligone英文名稱(chēng): L(+)-Arabinose溶血磷脂受體蛋白1抗體包裝5g
(-)-丁香樹(shù)脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→...英文名稱(chēng): Formamide deionized溶血磷脂受體蛋白2抗體包裝1g
(-)-丁香樹(shù)脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷英文名稱(chēng): Paraffin oil, light fraction溶血磷脂受體蛋白3抗體包裝5g
(2R)-5,7-二氧基二氫黃英文名稱(chēng): Potassium acetate內(nèi)皮的分化蛋白6抗體包裝1g
(2R,3R)-3,7,4'-三羥基-5-氧基-8-...英文名稱(chēng): Sodium acetate, anhydrate外生性骨疣樣蛋白2抗體包裝5g
(2R,3S)-3,7,4'-三羥基-5-氧基-8-...英文名稱(chēng): Agarose, low gelling temperature磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體包裝1g
(7S,7'R)-雙(3,4-亞二氧基)-rel-...英文名稱(chēng): Potassium phosphate, monobasic, anhydrous磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體包裝25g
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>800μg/mg,USP,BR碳酐6試劑盒酚;Kaempferol
唾液乳桿菌楊亞種Lactobacillus│salivarius subsp. salicinuus 質(zhì)量規(guī)格:>800μg/mg,含量測(cè)定碳酐3試劑盒山梔苷酯;hanzhiside met
微桿菌屬Microbacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)碳酐2試劑盒雙氫;Dihydroartemis
多巴胺D2亞類(lèi)受體激動(dòng)劑(Cabergoline)鋅指FYVE結(jié)構(gòu)域蛋白27抗體腦二磷膽 CYTIDINE-5'-DIPHOSPHOCHOLINE(P)Human, Mouse, Rat
受精卵抑制蛋白1抗體腦二磷膽 CYTIDINE-5'-DIPHOSPHOCHOLINE(P)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白471抗體豆苷 DAIDZIN(AS)Human, Mouse
γ-丁A受體相關(guān)膜蛋白3豆苷 DAIDZIN(AS)Human, Mouse
鋅指蛋白909抗體豆苷 DAIDZIN(AS)Human, Mouse
鋅指蛋白420抗體黃豆苷 DAIDZIN(P) (Compendial Traceable)Human
周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體黃豆苷 DAIDZIN(P) (Compendial Traceable)Human, Mouse
鋅指蛋白318抗體黃豆苷 DAIDZIN(P) (Compendial Traceable)Human
鋅指蛋白281抗體黃豆苷 DAIDZIN(P) (Compendial Traceable)Human, Mouse