拓撲異構酶I抑制劑(9-Aminocamptothecin)

拓撲異構酶I抑制劑(9-Aminocamptothecin)公司*的產(chǎn)品：Anti-IGFBP-5/IBP5 /FITC 熒光素標記胰島素樣生長因子結合蛋白-5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PMSA/FOLH1/FITC 熒光素標記前列腺特異膜抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus an

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：拓撲異構酶I抑制劑(9-Aminocamptothecin)

英文名稱：9-Aminocamptothecin

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

小鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFβ ELISA Kit

犬肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA檢測試劑盒CanineMyoglobin,MYO/MBELISAKit 96T/48T

犬腎上腺髓質素(ADM)免疫試劑盒 Dog adrenomedullin,ADM ELISA Kit

英文名稱HumanapoB100ELISAKit人載脂蛋白B100(apoB100)規(guī)格：96T/48T

持久型ECL化學發(fā)光顯影試劑盒10次

Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素17(IL-17)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒

Humanpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit 人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

Humancailageoligomericmaixprotein,COMPELISA試劑盒人軟骨寡聚基質蛋白(COMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉基因棉花GK19品系基因檢測試劑盒20次

humansnailhomolog2,SNAI2ELISAKit人蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬免疫球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human anapastic lymphoma kinase (ALK) ELISA Kit 人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA試劑盒

PorcinelisteriolysinELISAKit 豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforAMPKELISAKit魚磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶規(guī)格：48T/96T

血液胱氨酸(cystine)含量比色法定量檢測試劑盒20次

PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit豬血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
拓撲異構酶I抑制劑(9-Aminocamptothecin)14-3-3 zeta+delta 英文名稱： 14-3-3 protein ζ/δ抗體 0.1ml

human Fibrinogen 英文名稱： 羊抗人纖維蛋白原抗體 0.1ml

基質金屬蛋白酶-2抗體 Anti-MMP-2 0.1ml

Anti-S6PDH/FITC 熒光素標記抗6-磷酸山梨醇脫氫酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PDHA1(Ser293) 磷酸化丙酮酸脫氫酶α1抗體 規(guī)格 0.1ml

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22) 海葵神經(jīng)毒素(35肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg