ANP受體NRP1激動(dòng)劑(Nesiritide)

ANP受體NRP1激動(dòng)劑(Nesiritide)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-NHE1/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記鈉氫通道蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
cRaf/Raf1(c-raf 1) cRaf/Raf1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
神經(jīng)絲蛋白抗體(人) Anti-AD7C-NTP/NTP/AF human

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鏈輪枝菌Geobacillus stearothermophilus

Enterobacter moriBacillus megaterium

阿維菌鏈霉菌Micrococcus lysodeikticus

馬杜放線菌Acetobacter pasteurianus

謝瓦散囊菌Bacillus thuringiensis

猴頭菌Azotobacter chroococcum

馬克斯克魯維酵母Azotobacter chroococcum

佛雷德里克斯堡假單胞菌Azotobacter chroococcum

皺環(huán)球蓋菇Azotobacter chroococcum

污叉絲孔菌Azotobacter chroococcum

季也蒙邁耶氏酵母Azotobacter chroococcum

冷桿菌Azotobacter chroococcum

雷金斯堡約克氏菌（雷金斯堡預(yù)研菌）Azotobacter vinelandii

蠟葉曲霉Azotobacter vinelandii

巨大芽孢桿菌Azotobacter vinelandii

蜂蜜曲霉Azotobacter chroococcum

磷化蛋白激Cmu型抗體絨奧德蘑馬杜放線菌

磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體頭狀禿馬勃桃色擬青霉

磷化p21激活激4抗體粗皮馬勃支氣管炎博德特氏菌

磷化粘著斑激抗體雙柱林德氏鬼筆詹氏乳桿菌
ANP受體NRP1激動(dòng)劑(Nesiritide)ZIP Kinase 英文名稱： 凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體 0.1ml

DSN1 英文名稱： 著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體 0.2ml

Apelin receptor抗體 Anti-Apelin receptor/APJ receptor 0.1ml

Anti-HBsAg/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人乙肝表面抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Ephrin B(Ser300) 磷酸化Ephrin B抗體 規(guī)格 0.1ml

DMBT1 (Deleted in malignant brain tumor 1) DMBT1抑癌基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg