商品介紹:
SB1317是一種有效的CDK2,JAK2和FLT3抑制劑,IC50分別為13,73和56nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):937270-47-8 別名:TG02 純度:98.54% 分子量:372.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):CDK2,JAK2和FLT3抑制劑(SB1317)
英文名稱(chēng):SB1317
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
草螺菌屬 α-1 (-Thymosin alpha-1)Anti-CBFB AntibodySideroflexin3蛋白(SFXN3)
苔類(lèi)芽孢桿菌半胱蛋白蛋白-12(多肽)Anti-Caspase-2 AntibodySideroflexin2蛋白(SFXN2)
斯高特白冬孢酵母半胱蛋白蛋白-12抗原(人)Anti-CBLC AntibodySideroflexin1蛋白(SFXN1)
漆柄小孔菌膠質(zhì)系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(多肽)Anti-CBL AntibodyShootin1蛋白(Shootin1)
巨型艾耳球蟲(chóng)人腫瘤壞死因子-α(多肽抗原)Anti-CBLN1 AntibodyShisa同源物5(SHISA5)
裂褶菌重組人腫瘤壞死因子Anti-CBLN1 AntibodySHC-轉(zhuǎn)化蛋白4(SHC4)
茶葉 聯(lián)菊酯、死蜱 激受體相關(guān)蛋白Anti-CBLN2 AntibodySHC-轉(zhuǎn)化蛋白3(SHC3)
韓國(guó)梅奇酵母重組人白介-1受體拮抗劑Anti-CBLN3 AntibodySHC-轉(zhuǎn)化蛋白2(SHC2)
枯草芽胞桿菌DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白Anti-CCAR2 AntibodySHC-轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)
大腸埃希氏菌甲狀腺運(yùn)載蛋白(抗原)Anti-CBR3 AntibodySestrin3蛋白(SESN3)
中慢生根瘤菌重組人表皮生長(zhǎng)因子Anti-CBLN4 AntibodySestrin2蛋白(SESN2)
燼灰鏈霉菌神經(jīng)生長(zhǎng)因子的一種(抗原)Anti-CBX4 AntibodySestrin1蛋白(SESN1)
土星擬威爾酵母subsufficiens變種神經(jīng)生長(zhǎng)因子的一種(抗原)Anti-CCDC102A AntibodySesquipedalian1蛋白(Ses1)
細(xì)鏈格孢活化半胱蛋白蛋白-3抗原Anti-CCDC102A AntibodySerrate蛋白(SRRT)
葡萄座腔菌重組轉(zhuǎn)移GST標(biāo)簽蛋白Anti-CCDC102B AntibodySentan蛋白(SNTN)
硫色鐮刀菌半胱蛋白蛋白-4抗原Anti-CCDC102A AntibodySenataxin蛋白(SETX)
蛋白質(zhì)磷1B抗體PP2Cβ羅伊氏乳桿菌人心肌細(xì)胞
蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基1A抗體惰性解油螺旋菌正常人皮膚黑色細(xì)胞
蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基1B抗體糞腸球菌(糞鏈球菌)人低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞
蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基3A抗體鮑曼不動(dòng)桿菌人T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
CDK2,JAK2和FLT3抑制劑(SB1317)嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 3-Acetoxy-4-cadinen-8-one
黃硬皮馬勃 3-Acetoxy-24-hydroxydammara-20,2
靈芝 30-Hydroxylup-20(29)-en-3-one
擬威克酵母屬 3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphtha
謝瓦曲霉 3',4',7-Trimethoxyflavan
尖孢鐮孢 3,22-Dihydroxyolean-12-en-29-oic
傳染性喉氣管炎病 3-(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl)pro
大腸埃希 2β-Hydroxykolavelool
PET28a-EGFP 熒光蛋白大腸桿(綠色) 2'-O-Methylbroussonin C
無(wú) 2-Epitormentic acid
*蛹蟲(chóng)草 29-Norcycloart-23-ene-3,25-diol
綠色木霉 28-Hydroxy-3-oxoolean-12-en-29-o
赭曲霉 25-Hydroxycycloart-23-en-3-one
清酒假絲酵母 22-Dehydroclerosteryl acetate
枯草芽孢桿 21αH-24-Norhopa-4(23),22(29)-die