FAK抑制劑(PF-573228)

FAK抑制劑(PF-573228)公司*的產(chǎn)品：ANG ELISA Kit 大鼠血管生長(zhǎng)草銨 99.99% metals basis
sEPCR ELISA Kit 大鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體鹽苯 99%
KAF/AR ELISA Kit 大鼠角化內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白氟化銨 AR，98%
cAMP ELISA Kit 大鼠環(huán)腺苷氟化銨 ≥99.99% metals basis
AL

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：FAK抑制劑(PF-573228)

英文名稱：PF-573228

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

解脂亞羅酵母絲蛋白抑制劑B10抗體Anti-PGRMC1 Antibody(PB0825)賴酰氧化樣蛋白2(LOXL2)

擬康寧木霉5-羥色受體3C抗體Anti-PGR Antibody(PB0077)賴酰氧化樣蛋白1(LOXL1)

細(xì)鏈格孢長(zhǎng)鏈脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體Anti-PHB Antibody賴特異性去甲基化4A(KDM4A)

蘇云金芽孢桿菌莫里遜亞種腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白9/前列腺六跨膜上皮抗原4抗體Anti-PHB2 Antibody賴tRNA合成(KARS)

發(fā)酵畢赤酵母絲/蘇蛋白激31抗體Anti-PHF21A Antibody醌型二氫蝶啶還原(QDPR)

反硝化鹽單胞菌5-羥色受體3B抗體Anti-PHEX Antibody蝰蛇(Viperin)

雙孢蘑菇SCYL結(jié)合蛋白1抗體Anti-PHLPP1 Antibody喹啉磷核糖基轉(zhuǎn)移(QPRT)

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）)5-羥色受體2C抗體Anti-phospho-MAPT(Tau)(pSer202) Antibody快肌肌鈣蛋白C(TNNC2)

蘋果*（可換成cfcc 7946）精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體Anti-Phospho-Stat3(pTyr705) Antibody跨膜絲蛋白6(TMPRSS6)

矩圓黑盤孢突觸足蛋白抗體Anti-PI-16/PI16 Antibody跨膜絲蛋白4(TMPRSS4)

米曲霉CD2F-10抗體Anti-PI3 Antibody跨膜絲蛋白2(TMPRSS2)

大腸埃希菌Smad蛋白E3泛連接2抗體Anti-PI3K-gamma/PIK3CG Antibody跨膜蛋白5(TMEM5)

淺黃鏈霉菌磷化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白SCG10抗體Anti-PIAS1 Antibody跨膜蛋白2樣蛋白(TMEM2L)

蕈青霉染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白5抗體Anti-PIAS1 Antibody跨膜蛋白27(TMEM27)

寄生曲霉染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白6抗體Anti-PIAS2 Antibody跨膜蛋白2(TMEM2)

球孢白僵菌染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體Anti-PIAS3 Antibody跨膜蛋白1(TMEM1)

膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2抗體病牛沙門氏菌人膽道癌組織源細(xì)胞提取物

雄激受體復(fù)合物相關(guān)蛋白/核受體相互作用蛋白抗體腸侵襲性大腸埃希氏菌人卵巢癌組織源細(xì)胞提取物

SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體糖丁梭菌人肝癌組織源細(xì)胞提取物

神經(jīng)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因1抗體猴頭菌（猴頭，猴頭蘑，猴頭菇）人體胃癌組織源細(xì)胞提取物
FAK抑制劑(PF-573228)HPAF-II培養(yǎng)基 Toddaculine葡萄糖磷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa

海參珊瑚寄生 Interiotherin C磷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa

茄絲核 Kadsurin鐵蛋白Elisa

人型副球 Eupatoletin肉堿棕櫚?；D(zhuǎn)移Elisa

紅球 Coelonin乙酰羧化Elisa

蘇云金芽孢桿蘇云金亞種 Flavidinin過(guò)氧化物體增殖物激活受體βElisa

死亡谷芽孢桿 Murrayacarpin B肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa

米曲霉 Euchrenone B1固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1CElisa

根瘤 Euchrenone A10雷帕霉靶蛋白C1Elisa

需鈉弧 Cathayanon HAMP激活蛋白激αElisa

蘇云金芽孢桿 Hispidin核糖體S6K蛋白激Elisa

總狀共頭霉（不賣） Orobanone4E結(jié)合蛋白1Elisa

綠色木霉（暫時(shí)不提供） Curcumadionol糖皮質(zhì)Elisa

葡萄座腔 Zedoarondiol磷酸化外信號(hào)調(diào)節(jié)激Elisa

紫色桿 Curcolone谷氨酰轉(zhuǎn)Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)