改良Harris蘇木素染色液

改良Harris蘇木素染色液公司正在出售的產(chǎn)品：DMT1/FITC 熒光標(biāo)記金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1抗體IgG阿拉式-S- 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Dnmt1/FITC 熒光標(biāo)記DNA轉(zhuǎn)移1抗體IgG苯草 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Dnmt3a/FITC 熒光標(biāo)記DNA轉(zhuǎn)移-3α抗體IgG禾草滅 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Dnmt3 Beta/FITC 熒光標(biāo)記DNA轉(zhuǎn)移-3β抗體IgG黃草靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品
DNA-PKcs/FITC

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

全蝎（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 無磷化蛋白激MST1抗體包裝1g

全葉青蘭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Neferine多藥耐藥相關(guān)蛋白9抗體包裝250mg

拳參（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-O-Methylvisammioside基質(zhì)金屬蛋白-2抗體包裝5g

染料木苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N－Methylcytisine基質(zhì)金屬蛋白2抗體包裝1g

染料木/金雀異黃(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 9-Methoxycamptothecin有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1抗體包裝100g

人參（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 10-Gingerol有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體包裝25g

人參二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 6-gingerolβ2微球蛋白抗體包裝5g

人參莖葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 8-Gingerol磷化神經(jīng)上皮酪激/癌激10抗體包裝1g

人參蘆頭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ZingeroneE3連接MMS21蛋白抗體包裝5g

人參三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Zingerone環(huán)指蛋白60抗體包裝100g

人參皂苷CK(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 6-Shogaol肌球蛋白輕鏈7抗體包裝25g

人參皂苷F1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Gypenoside XLIX心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白抗體包裝5g

人參皂苷F2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： YM201636肌球蛋白重鏈9抗體包裝1g

人參皂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Poliumoside髓系/淋巴或混合型白血病11抗體包裝25g

人參皂苷F4,人參皂苷Rg4(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Hyperoside干擾誘導(dǎo)GTP結(jié)合蛋白MX2抗體包裝5g

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：純度99%抗副流感病IgM抗體試劑盒大黃-8-O-β-D-葡萄糖苷;Rhe

嗜寡養(yǎng)單胞菌Stenotrophomonas│acidaminiphila 質(zhì)量規(guī)格：>95%抗副流感病IgG抗體試劑盒豆腐果苷;Helicid

芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,USP可用于培養(yǎng)抗父體淋巴性抗體試劑盒丁東莨菪堿;Scopolamine
改良Harris蘇木素染色液枯草芽胞桿 4-噠羧酸雌二受體Elisa

釀酒酵母 溴化1-基-3-甲基咪唑雌Elisa

朱紅叢赤殼 6-甲巰基嘌呤雌Elisa

長(zhǎng)雙歧桿 二十四烷雌受體Elisa

小單孢 次氮基三乙酸三鈉鹽促紅生成受體Elisa

枯草芽孢桿 4-溴-3-苯甲促甲狀腺Elisa

釀酒酵母 3--2-氟甲苯促甲狀腺釋放Elisa

孢籃狀 3-甲酰促卵泡Elisa

殼 1-芐基-3-酮鹽酸鹽促腎上腺皮質(zhì)釋放Elisa

干草寒冷桿 5-溴-2-(甲巰基)-4-嘧啶甲酸促腎上腺皮質(zhì)Elisa

大腸埃希氏 1-溴-4--2,5-二促腎上腺皮質(zhì)釋放因子Elisa

沼澤紅假單胞 1-芐基-3-甲酸甲酯促生長(zhǎng)釋放Elisa

納塔爾鏈霉 2-氟-6-羥基吡啶促性腺釋放Elisa

大腸埃希氏 異植物催產(chǎn)Elisa

四脊裸胞殼 2,4-二氟二苯甲酮催乳Elisa