產(chǎn)品屬性:
中文名稱:c-Abl激活劑(DPH)
英文名稱:DPH
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
DPH是一種有效的,細(xì)胞滲透的c-Abl激活劑,在酶和細(xì)胞活動(dòng)中,能夠有效刺激c-Abl的活化。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):484049-04-9 純度:98.41% 分子量:336.32 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
谷棒桿菌Ⅲ型人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體Anti-SF3B6 Antibody人活化蛋白C(APC)
油葫蘆歐文氏菌大鼠組織因子Anti-SFRS2B Antibody人蛋白C(Protein C)
糞銹傘人抗環(huán)胍肽抗體Anti-SFT2D2 Antibody人蛋白C(Protein C)
Novosphingobium sp.小鼠白介27Anti-SFSWAP Antibody人血小板因子3(PF-3)
馬賽菌大鼠維生DAnti-SFXN4 Antibody人血小板因子3(PF-3)
枯草芽孢桿菌小鼠白介23Anti-SGO1 Antibody人凝血原片段F1+2(F1+2)ELISA
紫穗槐根瘤菌人抗核周因子抗體Anti-SFTPB Antibody人凝血原片段F1+2(F1+2)ELISA
白黃鏈霉菌大鼠維生K1Anti-SGO2 Antibody人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集(MBP/MBL)
杰丁畢赤酵母大鼠維生B12Anti-SGO1 Antibody人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集(MBP/MBL)
云南紅球菌小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)1Anti-SH2B2 Antibody人膜攻擊復(fù)合物(MAC)
蘇云金芽孢桿菌馬來(lái)西亞亞種人抗核抗體Anti-SH2D5 Antibody人膜攻擊復(fù)合物(MAC)
紫色變異鏈霉菌大鼠維生D3Anti-SH2D2A Antibody人優(yōu)球蛋白(EL)
平菇PL-27人抗肝腎微粒體抗體Anti-SH3GLB2 Antibody人優(yōu)球蛋白(EL)
蘇云金芽胞桿菌小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgAAnti-SH3BGR Antibody人游離血紅蛋白(f-Hb)
膠胞人抗α干擾抗體Anti-SH2D5 Antibody人游離血紅蛋白(f-Hb)
粉紅鐮孢小鼠抗凝血Ⅲ抗體Anti-SH3GLB2 Antibody人魚精蛋白1(PRM1)
干燥綜合征相關(guān)蛋白2抗體布氏白僵菌(卵孢白僵菌)1G10C11B12
甲狀腺激受體相互作用蛋白4抗體紅發(fā)夫酵母2D8F9H12
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)相互作用蛋白3抗體茄鏈格孢4E5F4A11
轉(zhuǎn)錄因子E2F二聚體蛋白2抗體茄鏈格孢(斜面)AC-G10
c-Abl激活劑(DPH)Acinetobacter pittii Nemec et al. 沃塔紫杉
卷枝毛霉卷枝變型 脫氫雌馬
植物乳桿 DL-蘇
版納大孔 D-蘇
粟酒裂殖酵母 山梗菜堿
金黃色葡萄球金黃亞種 L-蘇
豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS26 去甲二氫愈創(chuàng)木酸
正灰綠青霉 L-羥脯
乙型溶血性鏈球 米托酮
釀酒酵母 格魯特
嗜鹽噬冷 BOC-D-脯
聚多曲霉 毛果蕓香堿
韓國(guó)游動(dòng)微 BOC-L-脯
蠟樣芽孢桿 羅希吐堿
短小芽胞桿 栗精
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)