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Hoechst 33342細胞藍色熒光染料

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更新時間:2022-04-21 10:46:04瀏覽次數(shù):343

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10mg
貨號 GOY-01X9553 應用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Apoptosis?Inducers?Kit
Hoechst 33342細胞藍色熒光染料公司正在出售的產(chǎn)品:ATM 毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體固紅TR半化鋅鹽 90%
ATP2c1 鈣離子ATP酶通道蛋白抗體固紫B鹽 80%
phospho-ATM(Ser1981) 化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體N-酰-L-硫氨酰-L-白氨酰-L苯氨 97%
ATF6 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體(S)-(-)-2-酰琥珀酐 90%,工業(yè)級

詳細介紹

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

Hoechst 33342細胞藍色熒光染料

Hoechst 33342

10mg

1~3天

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:

本Hoechst 33342是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。

Hoechst 33342染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33342也常用于普通的細胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。

Hoechst 33342的大激發(fā)波長為346nm,大發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后,大激發(fā)波長為350nm,大發(fā)射波長為461nm。

Hoechst 33342溶于水,溶解度可達20mg/ml。用于細胞核染色時,推薦的Hoechst 33342工作濃度為0.5-10μg/ml。

CAS:23491-52-3

分子式:C27H28N6O·3HCl·3H2O

分子量:615.99

儲存條件:-20℃避光,有效期一年。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。

磷肌3激(PI3K)英文名稱:PI3K ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝25g

磷化腺苷活化蛋白激(pAMPK)英文名稱:pAMPK ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白9A抗體包裝5g

磷化細胞外信號調(diào)節(jié)激(p-ERK)英文名稱:p-ERK ELISA Kit縮C抗體包裝500mg

磷化細胞外信號調(diào)節(jié)激(pERK)英文名稱:pERK ELISA Kit谷草轉(zhuǎn)抗體包裝100g

磷化酪蛋白激JAK3(pJAK3)英文名稱:pJAK3 ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體包裝25g

磷化核因子-κB(p-NF-κB)英文名稱:p-NF-κB ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員8抗體包裝500g

磷化蛋白激C(P-PKC)英文名稱:P-PKC ELISA Kit?;摎溟L鏈抗體包裝25g

磷化蛋白激B(P-PKB)英文名稱:P-PKB ELISA Kit?;摎渲墟溈贵w包裝5g

磷化表皮生長因子受體(pEGFR)英文名稱:pEGFR ELISA Kit?;摎涠替溈贵w包裝1g

磷化基末端蛋白激(P-JNK)英文名稱:P-JNK ELISA Kit過氧化物?;趸?抗體包裝25g

淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)英文名稱:Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g

淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)英文名稱:LFA-3/CD58 ELISA Kit轉(zhuǎn)化生長因子β誘導蛋白3抗體(半胱和絲富含核蛋白1)包裝1g

亮腦啡肽(Leu-ENK)英文名稱:Leu-ENK ELISA Kit有絲分裂激A/B/C抗體包裝5g

粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)英文名稱:GM-CSF ELISA Kit蛋白酪激ATK抗體包裝1g

粒細胞集落刺激因子(G-CSF)英文名稱:G-CSF ELISA Kit長鏈脂肪連接1/2抗體包裝1g

ASCL2蛋白抗體免疫球蛋白G(IgG)Torezolid (TR-701; tedizolid) is a novel oxazolidinone for gram-positive infecti
Hoechst 33342細胞藍色熒光染料雞傷寒沙門氏 2,4,6-三氯喹唑啉雌受體檢測試劑盒

三葉草根瘤 3'-氨基-4'-氟苯乙酮紅生成素檢測試劑盒

鏈霉 DL-氨酰-DL-纈氨酸促紅生成素抗體檢測試劑盒

滑菇 RS-127445 鹽酸鹽促紅生成素受體檢測試劑盒

枯草芽孢桿 1-異基-3-氨基吡咯烷促黃體檢測試劑盒

烯霉素鏈霉 Dimethylammoniumdichlorotri(mu-chloro)bis[(R)-(+)-促甲狀腺受體抗體檢測試劑盒

麥芽糖假絲酵母 4-溴-3-三氟甲基吡唑促甲素檢測試劑盒

枯草芽孢桿 1-溴-3-甲基-2-丁酮促甲狀腺素釋放檢測試劑盒

玫煙色棒束孢 2'-OMe-Ac-C亞磷酰單體促卵泡素檢測試劑盒

玉米大斑病 N-乙?;?5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-2'-甲氧基胞苷促腎上腺皮質(zhì)釋放檢測試劑盒

栗疫 4-甲基-L-苯氨酸促腎上腺皮質(zhì)檢測試劑盒

果生鏈核盤 3-甲基-4-促腎上腺皮質(zhì)釋放因子檢測試劑盒

新月彎孢 4-巰基-4-甲基-2-戊酮促生長釋放檢測試劑盒

腐皮殼 2-氟-6-促胃液素檢測試劑盒

石榴干腐 4'-氨甲基-6-羧基熒光素促?;鞍讬z測試劑盒

 


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