以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
IN抑制劑(BMS-707035) | BMS-707035 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
BMS-707035是HIV-1整合酶(IN)抑制劑,IC50為15nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:729607-74-3 純度:99.97% 分子量:410.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
谷胱甘肽(氧化型)標(biāo)準(zhǔn)品英文名稱: VX-11e磷化Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體包裝25g
谷精草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alogliptin(SYR-322)抗體包裝5g
骨碎補(bǔ)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Curcumenol激肽釋放7抗體包裝1g
固公果根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BYL-719激肽釋放9抗體(舒血管9)包裝5g
瓜蔞(栝樓)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BYL-719激肽釋放14抗體包裝1g
瓜蔞皮(雙邊栝樓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: A66電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體包裝5mg
瓜蔞皮(栝樓)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SC514ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體包裝100ml
瓜子金(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: γ-CyclodextrinTIP60抗體包裝25g
瓜子金皂苷V英文名稱: Me-β-CD組蛋白賴特異性脫基1抗體包裝5g
瓜子金皂苷XXXI(對照品)英文名稱: Epothilone B(EPO906, Patupilone) 轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體包裝1g
瓜子金皂苷己(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BMS345541磷化周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體包裝5g
關(guān)白附(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IKK16磷化通道蛋白DRK1抗體包裝25g
關(guān)黃柏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trelagliptin succinate;SYR-472離子通道蛋白Kv3.4抗體包裝5g
管花苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol 離子通道蛋白Kv3.3抗體包裝1g
貫葉金絲桃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine 組蛋白去基化JMJD2B抗體包裝5g
金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格:含量82.5%~91.1%(每毫克頭孢吡肟含量,干品)抗心磷脂抗體IgA試劑盒甘草查爾B;Licochalcone
檸檬色赤桿菌Erythrobacter│citreus 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定抗心肌抗體試劑盒甘草查爾A;Licochalcone
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%(按照干品計(jì)算)抗心肌β1受體試劑盒甘草次;18 β-Glycyrrhet
IN抑制劑(BMS-707035)原肌球蛋白1抗體α-胡蘿卜 CAROTENE, ALPHA- (1.0mg/mL)(DICHLOROMETHANE)(SH)(PLEASE CALL)Human
轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)因子TEF3抗體鼠尾草酚 CARNOSOL(RG)(REQUEST QUOTE)Human
核轉(zhuǎn)錄因子25抗體CAROTEN-8'-AL, TRANS-8'-APO-BETA(P)Human, Mouse, Rat
微管相關(guān)蛋白抗體L-肌肽 CARNOSINE, L-(P)Human
酪激A/B/C抗體L-肌肽 CARNOSINE, L-(P)Human, Mouse, Rat
新型抑癌因抗體L-肌肽 CARNOSINE, L-(RG)Human
轉(zhuǎn)鐵蛋白/血清鐵傳遞蛋白抗體L-肌肽 CARNOSINE, L-(RG)Human, Mouse, Rat
腫瘤壞死因子配體超家族成員4抗體鼠尾草酚 CARNOSOL(P)Human, Rat
腫瘤壞死因子配體超家族成員14抗體β-石竹烯/反式石竹烯 CARYOPHYLLENE, (-)-trans-(SG)Human