β-聯(lián)蛋白激動(dòng)劑(WAY-262611)

β-聯(lián)蛋白激動(dòng)劑(WAY-262611)公司正在出售的產(chǎn)品： Gamma-Adaptin/FITC 熒光標(biāo)記銜接蛋白γ抗體IgG* 99.95% metals basis,粉末
AP2 alpha/FITC 熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α抗體IgG硫鈉 AR，98.5%
alpha Adaptin/FITC 熒光標(biāo)記銜接蛋白1抗體IgG硫鈉 CP，98%
Apaf-1 /FITC 熒光標(biāo)記凋

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
貝萊斯芽胞桿菌嗜中性?？乖?/span>CD177抗原Anti-CD300LB AntibodyRasGTP激活蛋白1(RASA1)

根瘤菌CD24抗原Anti-CD300LD AntibodyRAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)

蘇云金芽孢桿菌白分化抗原CD2APAnti-CD32(FCGR2C) AntibodyRAS癌基因家族成員RAB37(RAB37)

桂花耳*CD33抗原(大、小鼠）Anti-CD37 AntibodyRAS癌基因家族成員RAB1A(RAB1A)

秦氏蜜環(huán)菌CD34抗原（表面的唾液粘蛋白）Anti-CD3EAP AntibodyRAR相關(guān)孤兒受體γ(RORγ)

芽孢桿菌CD38多肽（小鼠、大鼠）Anti-CD53 AntibodyRap鳥核苷交換因子1(RAPGEF1)

嗜中溫寒冷桿菌CD38抗原（人）Anti-CD81 AntibodyRalA結(jié)合蛋白1(RALBP1)

解淀粉芽孢桿菌CD36（多肽）Anti-CD84 AntibodyRaftlin2蛋白(RFTN2)

阿姆斯特丹曲霉CD7抗原Anti-CD98 AntibodyRAD54樣蛋白2(RAD54L2)

解角質(zhì)微桿菌CD40L抗原Anti-CD93 AntibodyRAD51同源物(RAD51)

大腸桿菌CD44抗原 (多肽抗原)Anti-CD97 AntibodyRAD23同源物B(RAD23B)

斐濟(jì)球腔菌抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3Anti-CD70 AntibodyRAD1同源物(RAD1)

淡紫擬青霉醋促生長(zhǎng)激釋放肽2Anti-CD99 AntibodyRac-GTP激活蛋白1(RACGAP1)

假單胞菌屬醋促生長(zhǎng)激釋放肽6Anti-CDC14A AntibodyRab親和蛋白3A(RPH3A)

嗜麥芽寡單胞菌五勝肽/容肽—M肽Anti-CDC16 AntibodyRabconnectin3蛋白(RC3)

聚生殼菌醋諾坦IIAnti-CDC23 AntibodyRAB11家族相互作用蛋白3(RAB11FIP3)

組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移5抗體耐硼賴芽孢桿菌大鼠腎足細(xì)胞

腫瘤錯(cuò)配修復(fù)基因PMS1抗體少動(dòng)鞘單胞菌人T淋巴細(xì)胞系

原鈣粘蛋白γA7抗體Acidovoraxsp.人骨髓瘤細(xì)胞

原鈣粘蛋白γA8抗體不動(dòng)桿菌屬人胰腺癌細(xì)胞
β-聯(lián)蛋白激動(dòng)劑(WAY-262611)葡萄座腔 Tilifodiolide

果生假絲酵母 云南紅豆杉酯甲

Microbacterium halotolerans Tatarinoid A

鮭色鎖擲酵母 Stephavanine

褐孢大禿馬勃 Splendoside

少根根霉原變種 Shizukanolide F

灰草黃鏈霉 Serpentinic acid

多粘類芽孢桿 半翅鹽膚木內(nèi)酯

枯草芽孢桿 Secaubryenol

透明俊片 Scutebata F

香菇 Scutebata E

根瘤 Scutebata C

云芝栓孔（變色栓） Scutebarbatine X

平臍蠕孢 Scutebarbatine B

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 黃花香茶菜甲，黃花甲，大萼變型甲