商品介紹:
JI-101是有的有抗癌活性的多靶點(diǎn)激酶抑制劑,可抑制VEGFR2,PDGFRβ和EphB4。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):900573-88-8 純度:99.78% 分子量:466.33 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
曲安西龍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Citicoline sodiumDHH蛋白抗體包裝100g
曲洛司坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Erythromycin stearateD型多巴色脫羧包裝25g
曲尼司特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): SpermineDNA聚合α抗體包裝25g
曲匹布通(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): SpermidineMREG蛋白抗體包裝5g
曲匹地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Spermidine phosphate salt hexahydrate RAS相關(guān)抑生長(zhǎng)蛋白1抗體包裝5MG
曲昔匹特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Myriocin from Mycelia steriliaMAP激激活死亡域蛋白2C抗體包裝1g
去(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Spermidine trihydrochloride狀腺5'脫3抗體包裝25g
去萬(wàn)古霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): CastanospermineD型阿片受體抗體包裝5g
去氧膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Spermine tetrahydrochloride畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1抗體包裝10g
去氧尿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Luciferin potassium腦發(fā)育同源蛋白2抗體包裝50g
炔諾孕(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ranitidine HCl周期D相互作用蛋白1抗體包裝5g
壬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ranitidine HCl發(fā)育相關(guān)蛋白DDX3Y抗體包裝100ml
壬二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Fluorescein disodium salt核仁蛋白NAP57抗體包裝25ml
日蟾蜍他靈;和蟾他靈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Luciferin sodium saltDLST蛋白抗體包裝500ml
日當(dāng)藥黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 2',7'-Dichlorofluorescein Sodium Salt 橋粒斑蛋白1+2抗體包裝10g
地芽孢桿菌Geobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胃內(nèi)因子試劑盒四氫黃連堿;Tetrahydrocopt
: =ATCC25470=CBS703.69=CCRC11919=DSM40461=IFO13資源名稱(chēng): 利迪鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,EP6.2胃泌調(diào)節(jié)ELISA Kit似梨木雙黃;Ochnaflavone7
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus Frankland and Frankland 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胃泌抗體試劑盒似梨木雙黃-7-O-β-D-吡喃葡萄糖
多靶點(diǎn)激酶抑制劑(JI-101)小鼠抗人紅單克抗體小白菊提取物#1 Feverfew (Tanacetum parthenium) Aerial Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse
視黃受體應(yīng)答蛋白2抗體Pau d'arco (Tabebuia impetiginosa) Bark Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse, Rat
抗Rap1A抗體Pau d'arco (Tabebuia impetiginosa) Bark Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse, Rat
RAS癌因相關(guān)蛋白R(shí)AB7抗體Pau d'arco (Tabebuia impetiginosa) Bark Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE)Human
c-Myc應(yīng)答蛋白抗體Pau d'arco (Tabebuia impetiginosa) Bark Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse
RAS癌因相關(guān)蛋白R(shí)AB6B抗體Pau d'arco (Tabebuia impetiginosa) Bark Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse, Rat
Rab蛋白GTP激活蛋白1抗體Pau d'arco (Tabebuia impetiginosa) Bark Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse, Rat
結(jié)腸癌相關(guān)因蛋白抗體(resistin-like β)羅漢果提取物#6 Luo han guo (Siraitia grosvenori) Fruit Extract #6 BXL(REQUEST QUOTE)Human, Mouse, Rat
磷化原癌因c-Met相關(guān)酪激抗體羅漢果提取物#5 Luo han guo (Siraitia grosvenori) Fruit Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE)Human