微絲綠色熒光探針

微絲綠色熒光探針公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 化p21激活激1/2抗體N--N-（2-羥-3-磺）-3-鈉鹽 99%
Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) 化p21激活激1/2抗體3,3',5,5'-四聯(lián)苯鹽鹽 98%
phospho-PAK1(Ser144) 化p21激活激1抗體

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

白茅根（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Manganese dioxide磷化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體包裝500ml

白皮杉,3'-羥基白藜蘆;比杉特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： N,N'-Diphenylurea磷化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體包裝25g

白皮杉-3'-O-葡萄糖苷英文名稱(chēng)： PEG 600磷化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體包裝5g

白前（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Prussian blue磷化雌激受體α抗體包裝1mg

白屈菜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Pyronin B磷化真核翻譯起始因子4B抗體包裝1g

白屈菜紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： X-Galactosamidide真核翻譯起始因子4B抗體包裝250mg

白芍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Fucoxanthin磷化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體包裝100g

白術(shù)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Brij 58磷化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體包裝25g

白術(shù)內(nèi)酯III（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Dithiooxamide磷化真核翻譯起始因子4G抗體包裝500g

白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： DNase II, from Pocine Pancreas表皮生長(zhǎng)因子受體5抗體包裝100g

白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ；蒼術(shù)內(nèi)酯II（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： HEC, hydroxyethyl cellulose電子轉(zhuǎn)移黃蛋白β肽/黃蛋白抗體包裝25g

白頭翁（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： L-Aspartic acid sodium salt, monohydrate鈉通道蛋白α ENaC包裝500g

白頭翁皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Lead granules轉(zhuǎn)錄因子E2F8抗體包裝1g

白頭翁皂苷B英文名稱(chēng)： Mucin from bovine submaxillary glands內(nèi)皮單核激活肽2抗體包裝5g

白頭翁皂苷B4（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： N,N'-Disuccinimidyl carbonate (DSC)外基質(zhì)蛋白2抗體包裝25g

抵抗微桿菌Microbacterium│resistens 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品瞬時(shí)受體電位陽(yáng)離子通道,亞科C,成員6試劑盒人參皂苷Rb2;GINSENOSIDE

白色假絲酵母菌Candida│albicans 質(zhì)量規(guī)格：>900μg/mg, USP,BR閘蛋白14試劑盒人參皂苷Rb1;Ginsenoside

肺炎鏈球菌Streptococcus│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定通道蛋白5試劑盒20(s)-人參皂苷Rg1;
微絲綠色熒光探針釀酒酵母 1,3-二溴-4,6-二氟苯葡萄糖苷Elisa

大腸埃希 甘油磷酸絲裂原激活蛋白激激6Elisa

枯草芽孢桿枯草亞種 4-溴-2,5-二氟孤兒G蛋白偶聯(lián)受體Elisa

木耳Au888 3-溴-2,6-二氟受體自身IgG抗體Elisa

彩色豆馬勃 2,4,6-三氟受體自身IgM抗體Elisa

暗擬莖點(diǎn)霉* 1-乙基吡唑受體自身IgA抗體Elisa

黑曲霉 3,5-二硝基-2-甲酸D-精氨酸Elisa

圍小叢殼 2-溴-6-甲氧基CD45分子Elisa

球孢白僵 (R)-(-)-1-氨基-2-?；摎銭lisa

枯草芽孢桿 4-乙氧基二苯甲酮長(zhǎng)鏈脂酰基coA脫氫Elisa

青霉屬 2-氨基-,4-萘醌沙眼衣原體抗體Elisa

耐堿馬賽 4,4'-聯(lián)吡啶阿黑皮原Elisa

炭黑曲霉 3,5-二氯膀胱腫瘤抗原Elisa

黑附球 (R)-1-BOC-3-羥甲基哌腺苷酸環(huán)化關(guān)聯(lián)蛋白2Elisa

八孢裂殖酵母 5-氯苯并噻唑羧肽EElisa