ROCK-I和ROCK-II抑制劑(Y-27632)

ROCK-I和ROCK-II抑制劑(Y-27632)公司正在出售的產(chǎn)品：Rabbit MK IgM/FITC 熒光標(biāo)記兔抗猴IgMFmoc-Phe(4-Cl)-Wang resin 100-200 mesh, 1%DVB
Rabbit pig IgG/FITC 熒光標(biāo)記兔抗豬IgGFmoc-Phe(4-F)-Wang resin 100-200 mesh, 1%DVB
Rabbit Pig I

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
細(xì)黃鏈霉菌遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白樣抗體Human HOGA1(Probable 4-hydroxy-2-oxoglutaRate aldolase, mitochondrial) ELISA Kit人抗角蛋白抗體免疫試劑盒

*茄鏈格孢腺癌標(biāo)志物CHMP2A抗體Human ZNF654(Zinc finger protein 654) ELISA Kit人抗膠原蛋白抗體(CLA)免疫試劑盒

平菇1染色質(zhì)修飾蛋白CHMP6抗體Human ERN1(Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1) ELISA Kit人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)免疫試劑盒

鐮毛霉染色質(zhì)修飾蛋白CHMP5抗體Human TNN(Tenascin-N) ELISA Kit人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)免疫試劑盒

炭疽芽孢桿菌間隙連接蛋白31.1抗體Human HBP1(HMG box-containing protein 1) ELISA Kit人抗甲狀腺過(guò)氧化物抗體(TPO-Ab)免疫試劑盒

擬熱帶假絲酵母緊密連接蛋白10抗體Human TSPAN14(Tetraspanin-14) ELISA Kit人抗甲型肝炎病抗體IgM(anti-HAV IgM)免疫試劑盒

馬克斯克魯維酵母緊密連接蛋白23抗體Human HIST2H2BE(Histone H2B type 2-E) ELISA Kit人抗甲型肝炎病抗體IgG(anti-HAV IgG)免疫試劑盒

釀酒酵母緊密連接蛋白22抗體Human DNAH17(Dynein heavy chain 17, axonemal) ELISA Kit人抗甲型肝炎病(HAV)抗體免疫試劑盒

卡坦正青霉緊密連接蛋白19抗體Human OPLAH(5-oxoprolinase) ELISA Kit人抗基底節(jié)(BG)自身抗體免疫試劑盒

摩洛哥芽孢桿菌緊密連接蛋白18抗體Human OPLAH(5-oxoprolinase) ELISA Kit人抗肌內(nèi)膜抗體(EMA)(IgA)免疫試劑盒

熱帶假絲酵母緊密連接蛋白17抗體Human SAAL1(Protein SAAL1) ELISA Kit人抗肌內(nèi)膜(EMA)抗體(IgG)免疫試劑盒

發(fā)狀孢囊游動(dòng)放線菌緊密連接蛋白16抗體Human APMAP(Adipocyte plasma membrane-associated protein) ELISA Kit人抗肌集鈣蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒

秦氏蜜環(huán)菌CELF3蛋白抗體Human SRF(Serum response factor) ELISA Kit人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)免疫試劑盒

灰耳擔(dān)布勒酵母鈣粘蛋白超家族CELSR1抗體Human MTHFR(Methylenetetrahydrofolate reductase) ELISA Kit人抗黃體生成抗體(Anti LH Ab)免疫試劑盒

巴氏醋桿菌羅旺亞種牙骨質(zhì)蛋白1抗體Human LILRB4(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4) ELISA Kit人抗環(huán)胍肽(CCP)抗體免疫試劑盒

傘枝犁頭霉CENPBD1蛋白抗體Human PPP1R14B(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 14B) ELISA Kit人抗琥珀脫氫黃亞單位抗體(IgG)免疫試劑盒

解淀粉芽孢桿菌Bacillus│amyloliquefaciens 質(zhì)量規(guī)格：AR17-類(lèi)固試劑盒(3β,6α,16β,20R,24S)-

鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：IND17-羥孕烯異黃芪皂苷II

: Ye2223資源名稱(chēng): 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 質(zhì)量規(guī)格：BS,用于生物學(xué)染色17羥孕試劑盒異黃芪皂苷I
ROCK-I和ROCK-II抑制劑(Y-27632)葡萄座腔 2,4-二-5-(三氟甲基)嘧啶CD68分子Elisa

Brenneria nigrifluens Glu-Glu血紅蛋白α亞基Elisa

黃曲霉 3,6-二溴噻吩[3,2-b]噻吩血管緊張1-9Elisa

三葉草根瘤 1-Boc-3-(甲氨基)彈性蛋白Elisa

網(wǎng)脈木耳 3-甲氧基苯肼鹽酸鹽高靈敏促甲狀腺Elisa

釀酒酵母 乙酸鈉-d3胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-6Elisa

細(xì)鏈格孢 4,7-二羥基-1,10-菲羅啉白介17BElisa

出芽短梗霉(黑酵母） Phe-Val四氫孕酮Elisa

生芽紅細(xì) 2-(2,4-二氟苯基)吡啶胃泌17Elisa

梨生囊殼孢 Trimebutine阿黑皮原Elisa

蘇云金芽孢桿庫(kù)爾斯塔克亞種 7-(三氟甲基)靛紅異檸檬酸脫氫Elisa

乳桿屬 2-(3-吡啶)-4-甲基噻唑-5-羧酸芳香化Elisa

豬鏈球（不可提供） 3-氟-4-甲氧基苯甲酰類(lèi)固急性調(diào)節(jié)蛋白Elisa

乙型副傷寒沙門(mén) 6'-甲氧基-2'-乙酰萘膽固側(cè)鏈裂解Elisa

鏈球(不定種) 2,3-二甲基-4-甲氧基苯甲棕櫚酰Elisa