胱天蛋白酶抑制劑(Biotin-VAD-FMK)

胱天蛋白酶抑制劑(Biotin-VAD-FMK)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-PAX7/FITC 熒光素標(biāo)記配對(duì)盒基因7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗大鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
多巴胺脫羧酶抗體 Anti-DDC 0.1ml
Donkey Anti-

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Very low density lipoprotein receptor (VLDLR) ELISA Kit 人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒

guineapigLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforANG-IIELISAKit大鼠血管緊張素Ⅱ規(guī)格：48T/96T

血液脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

PorcineDexamethasone,DexELISAKit豬地塞米松(Dex)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-4 ELISA Kit

大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測(cè)試劑盒RatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 96T/48T

人U1小核核糖核蛋白A(SPA)免疫試劑盒 Human SPA ELISA kit

英文名稱MouseGhrelinELISAKit小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽(Ghrelin)規(guī)格：96T/48T

TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP直接檢測(cè)試劑盒(含AP一抗)10次

Rabbitleoopichormone,LHELISA試劑盒兔子促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒

Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforApo-H(HumanApolipoproteinH)ELISAKit人載脂蛋白H規(guī)格：48T/96T

溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)溶液(100毫摩爾)1毫升

Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISAKit豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
胱天蛋白酶抑制劑(Biotin-VAD-FMK)Semaphorin 5B 英文名稱： 跨膜蛋白SEMA5B抗體 0.2ml

Dengue virus envelope glycoprotein E 英文名稱： 登革熱病毒包膜糖蛋白E抗體 0.2ml

α-連環(huán)蛋白抗體(α鏈接素) Anti-α-Catenin/α-cats 0.1ml

Anti-Tyrosinase/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HP1 gamma (Ser93) 磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體 規(guī)格 0.1ml

ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2mg