Pim激酶抑制劑(M-110)

Pim激酶抑制劑(M-110)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-NEDD4L/NEDD4-2/FITC 熒光素標(biāo)記泛素連接酶NEDD4-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-CD64/PE 熒光素PE標(biāo)記免疫球蛋白G Fc段受體IMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CD34抗體 Anti-CD34 0.1ml
Goat Ant

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

大腸埃希菌Bergeyella zoohelcum

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌Bifidobacterium bifidum

大腸埃希菌Bifidobacterium bifidum

短小桿菌屬Bifidobacterium bifidum

分枝節(jié)桿菌Bifidobacterium bifidum

球孢白僵菌Bifidobacterium longum subsp. longum

大孢鏈格孢菌Bifidobacterium longum subsp. longum

ZhihengliuellaBifidobacterium longum subsp. longum

假絲酵母屬Bifidobacterium pseudocatenulatum

Ag-12（蘑菇）Bifidobacterium pseudocatenulatum

漿孢毛霉Bosea thiooxidans

青春雙歧桿菌Bosea thiooxidans

釀酒酵母Bowmanella pacifica

鏈霉菌Brachybacterium faecium

無花果曲霉Brachybacterium paraconglomeratum

枯草芽孢桿菌Brachybacterium paraconglomeratum

小鼠載脂蛋白A1(Apo-A1)免疫試劑盒活化復(fù)制因子2抗體人白活化黏附因子(ALCAM)二乙?；蠡ㄐ不▋?nèi)酯

小鼠孕激/孕(PROG)免疫試劑盒腺苷單磷活化蛋白激β1抗體人白活化黏附因子(ALCAM)法林二

小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)IgM抗體免疫試劑盒糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體人活化A(ACV-A)番茄紅

小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)IgG抗體免疫試劑盒血管緊張Ⅱ抗體人活化A(ACV-A)番茄堿
Pim激酶抑制劑(M-110)ZNF3 英文名稱： 鋅指蛋白3抗體 0.2ml

DERLIN-1 英文名稱： 細(xì)胞膜蛋白Derlin抗體 0.2ml

血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗體 Anti-Agtr1/AT1a 0.1ml

Anti-XBP-1/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-FAK(Tyr577) 磷酸化粘著斑激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

CTn1 (cardiac troponin 1) 心肌肌鈣蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg