公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JNK1抑制劑(DB07268)
英文名稱:DB07268
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
DB07268是JNK1抑制劑,IC50為9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):929007-72-7 純度:98.44% 分子量:321.33 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
肺形側(cè)耳,平菇Halobacillus trueperi
白絲倫茨氏菌Bacillus hwajinpoensis
茶藨子葡萄座腔菌Bacillus hwajinpoensis
牙齦卟啉單胞菌(可訂)Bacillus hwajinpoensis
含羞草根瘤菌Bacillus hwajinpoensis
大腸埃希氏菌Bacillus selenatarsenatis
匍匐曲霉原變種Bacillus pumilus
弗雷德里克斯堡假單胞菌Halobacillus salinus
腐皮鐮孢Halobacillus salinus
膠凍樣芽孢桿菌Bacillus aquimaris
兩形頭曲霉Halobacillus salinus
草芽枝霉Bacillus aquimaris
節(jié)桿菌Bacillus aquimaris
熒光假單胞菌Bacillus aquimaris
巴氏醋桿菌羅旺亞種Bacillus megaterium
香菇Bacillus vietnamensis
豬腎上腺(EPI)免疫試劑盒低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)薄荷
豬神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒原始廣泛存在蛋白1抗體人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)補(bǔ)骨脂查爾
豬神經(jīng)特異性烯化(NSE)免疫試劑盒錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體人凋亡抑制因子(IAP)補(bǔ)骨脂定
豬神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移1人凋亡抑制因子(IAP)補(bǔ)骨脂二氫黃
JNK1抑制劑(DB07268)Sprouty 2 英文名稱: 快速發(fā)育生長(zhǎng)因子同源蛋白2抗體 0.1ml
EEA1 英文名稱: 早期內(nèi)吞體相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
淋巴細(xì)胞趨化因子CCL21抗體 Anti-CCL21/6Ckine 0.1ml
Anti-VAP1/FITC 熒光素標(biāo)記血管粘附蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HER4 (Tyr1162) 磷酸化HER4抗體 規(guī)格 0.1ml
CD177/NB1 peptide 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg