商品介紹:
Lidocaine是組胺H1受體反向激動(dòng)劑,IC50>32μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):137-58-6 別名:Lignocaine 純度:99.52% 分子量:234.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
叉頭框蛋白O3(FOXO3)ELISA Kit英文名稱:FOXO3 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2抗體包裝1g
叉頭框蛋白M1(FOXM1)ELISA Kit英文名稱:FOXM1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白146抗體包裝5g
叉頭框蛋白A2(FOXA2)ELISA Kit英文名稱:FOXA2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體包裝1g
層粘連蛋白β1(LAMβ1)ELISA Kit英文名稱:LAMβ1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158抗體包裝250mg
層粘連蛋白α1(LAMα1)ELISA Kit英文名稱:LAMα1 ELISA Kit鈣粘附蛋白-11抗體包裝100g
補(bǔ)體因子D(CFD)ELISA Kit英文名稱:CFD ELISA Kit核仁蛋白C23抗體包裝25g
補(bǔ)體因子B(CFB)ELISA Kit英文名稱:CFB ELISA Kit皮膚相互作用蛋白2抗體包裝5g
補(bǔ)體成分5a受體1(C5aR1)ELISA Kit英文名稱:C5aR1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框149抗體包裝25g
補(bǔ)體成分5a(C5a)ELISA Kit英文名稱:C5a ELISA Kit碳化合物激結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)抗體包裝5g
補(bǔ)體成分5(C5)ELISA Kit英文名稱:C5 ELISA Kit尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝1g
補(bǔ)體成分4b(C4b)ELISA Kit英文名稱:C4b ELISA Kit補(bǔ)體C1qTNF8鏈多肽抗體包裝5g
補(bǔ)體成分4a(C4a)ELISA Kit英文名稱:C4a ELISA Kit21號(hào)染色體開放閱讀框62抗體包裝1g
補(bǔ)體成分4(C4)ELISA Kit英文名稱:C4 ELISA Kit磷化胞漿型磷脂A2抗體包裝5g
補(bǔ)體成分3(C3)ELISA Kit英文名稱:C3 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框46抗體包裝1g
補(bǔ)體3a(C3a)ELISA Kit英文名稱:C3a ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框103抗體包裝25g
鯊魚弧菌Vibrio│carchariae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品游離雌三試劑盒異鼠李-3-O-半乳糖苷;Isorha
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR游離β絨毛膜促性腺激試劑盒茵芋堿;Skimmianine
沙門氏菌Salmonella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定幽門螺旋菌抗體試劑盒一枝蒿庚;Bullatine G;so
組胺H1受體反向激動(dòng)劑(Lidocaine)兔抗水貂IgG3-溴 3-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human, Mouse, Rat
驢抗人IgG3-溴 3-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T)Human
驢抗兔IgG4-溴磺酰 4-Bromobenzenesulfonyl Chloride >98.0%(T)Human, Mouse
驢抗豚鼠IgG4-溴磺酰 4-Bromobenzenesulfonyl Chloride >98.0%(T)Human
鼠抗人IgG單克抗體4-溴 4-Bromobenzaldehyde >95.0%(GC)Human
PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體4-溴 4-Bromobenzaldehyde >95.0%(GC)Human
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體3-溴 3-Bromobenzaldehyde >98.0%(GC)Human, Mouse, Rat
Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體3-溴 3-Bromobenzaldehyde >98.0%(GC)Human, Mouse, Rat
Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體巴豆溴 Crotyl Bromide >83.0%(GC)Human, Mouse, Rat