CDK4抑制劑(ON123300)

CDK4抑制劑(ON123300)公司正在出售的產(chǎn)品：NR2B/NMDAR2B /FITC 熒光標(biāo)記谷氨受體2B抗體IgG十一 97%
NR2A/NMDAR2A/FITC 熒光標(biāo)記谷氨受體2A抗體IgG十一 ≥96%, FCC, Kosher
Phospho-NMDAR2A (Tyr1246) /FITC 熒光標(biāo)記化谷氨受體2A抗體IgG桃 98%
Phospho-NMDAR2A (Tyr1

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
枯草芽孢桿菌人吖啶橙Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠髓過氧化物(MPO)

柔嫩艾耳球蟲人喋呤Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠顆粒B(Gzms-B)

中國(guó)臺(tái)灣根霉人對(duì)基甲Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠顆粒B(Gzms-B)

亞灰光柄菇人Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)

炭疽病人免疫核糖核Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)

鏈格孢人β萘Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠顆粒A(Gzms-A)

多色節(jié)桿菌人β內(nèi)酰抑制劑Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠顆粒A(Gzms-A)

短芽孢桿菌人α半乳糖基抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)

小孢綠杯菌人αN已?；咸擒誃acillus subtilis subsp. subtilis小鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)

黑曲霉人α2纖溶抑制物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)

果生鏈核盤菌人高香草Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)

南擬酵母人煙酰腺二核苷磷Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)

海海桿狀菌人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)

釀酒酵母人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)

宛氏擬青霉人芳香烴受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)

釀酒酵母人特異性巨噬武裝因子Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)

鋅指蛋白804A抗體落葉松木層孔菌大長(zhǎng)舌果蝠肌肉細(xì)胞

負(fù)調(diào)控因子白細(xì)胞介2抗體青柄多孔菌大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞

鋅指蛋白BED3抗體鬼傘盤羊皮膚細(xì)胞

鋅指蛋白379抗體短芽孢桿菌樹鼩肺成纖維樣細(xì)胞
CDK4抑制劑(ON123300)萬(wàn)壽菊鏈格孢 去乙酰基Ophiopojaponin A

矩圓黑盤孢 百里

釀酒酵母 元-3-O-β-D-木糖-(1→3) -β-D-葡萄糖苷

聚貪噬 甲基百里藍(lán)

深海微桿 3-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-β-葡萄糖麥冬苷元

毛頭鬼傘，雞腿菇 二甲苯藍(lán)

短柄帚霉 二甲苯青FF

食砜節(jié)桿 澤瀉A

嗜酸乳桿 麥冬皂苷D'

無(wú)恒變形 Ophiopojaponin C

馬賽 (+)松脂-β-D-吡喃葡萄糖苷

釀酒酵母 曲苯藍(lán)

蠟樣芽孢桿 澤瀉A-24-醋酸酯

圍小叢殼 噻唑藍(lán)

異常畢赤酵母 考馬斯亮藍(lán)R250