產(chǎn)品屬性:
中文名稱:DHPS抑制劑(GC7 Sulfate)
英文名稱:GC7 Sulfate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
GC7Sulfate是一種脫氧嘌呤合成酶(DHPS)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:150417-90-6 分子量:270.35 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
糖蛋白130(gp130/CD130)ELISA Kit英文名稱:gp130/CD130 ELISA Kit蛇巴曲抗體包裝5g
瘦受體(Leptin receptor)ELISA Kit英文名稱:Leptin receptor ELISA KitBH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體包裝100ml
瘦受體(LEPR)ELISA Kit英文名稱:LEPR ELISA KitBax抗體包裝25ml
瘦(LEP/Leptin)ELISA Kit英文名稱:LEP/Leptin ELISA KitBcl-2抗體包裝500ml
噬性細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)ELISA Kit英文名稱:Eotaxin ELISA Kit腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體包裝1g
嗜性粒細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)ELISA Kit英文名稱:Eotaxin ELISA Kit堿性成纖維生長因子抗體包裝250mg
生長調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA Kit英文名稱:GROα/CXCL1/MGSA ELISA Kit癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體包裝100ml
生長分化因子15(GDF-15)ELISA Kit英文名稱:GDF-15 ELISA Kit牛血清白蛋白抗體包裝25ml
神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA Kit英文名稱:fractalkine/CX3CL1 ELISA Kitβ-酪蛋白抗體包裝5ml
凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)ELISA Kit英文名稱:LOX-1 ELISA Kitβ葡聚糖受體抗體包裝100g
苗條受體(Leptin receptor)ELISA Kit英文名稱:Leptin receptor ELISA Kit蛇蛋白巴曲抗體包裝500g
苗條(OB)ELISA Kit英文名稱:OB ELISA Kit非受體性蛋白酪激ETK抗體包裝25mg
苗條(LEP)ELISA Kit英文名稱:LEP ELISA Kit磷化非受體性蛋白酪激ETK抗體包裝25g
粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)ELISA Kit英文名稱:GMCSF/CSF2 ELISA Kit磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體包裝5g
可溶性E選擇(sE-selectin)ELISA Kit英文名稱:sE-selectin ELISA KitBarX1蛋白抗體包裝100g
染色體脆弱性相關(guān)基因抗體干擾α4(IFNα4)Epirubicin hydrochloride (4'-Epidoxorubicin hydrochloride) 是阿霉的半合成的 L-阿拉伯糖衍生物,能
DHPS抑制劑(GC7 Sulfate)絲蛋白/線粒體絲蛋白多肽抗原鹽環(huán)壬酯雜質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
離子鈣接頭蛋白抗原鹽吡格列雜質(zhì)/5-{4-[2-(5-乙-2-吡啶...Human, Mouse
小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗原鹽表阿霉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
干擾誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗原鹽卡特羅(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
干擾-α抗原(人)鹽美(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
干擾-gamma受體1抗原鹽米(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
胰島樣生長因子結(jié)合蛋白-2(多肽)鹽帕他莫(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
胰島樣生長因子結(jié)合蛋白-3抗原鹽維林(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
胰島樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)