PI3Kδ抑制劑(ZSTK474)

PI3Kδ抑制劑(ZSTK474)公司*的產(chǎn)品：TSH/FITC 熒光標記小鼠抗人促狀腺單克隆抗體IgG
TSHR/FITC 熒光標記促狀腺受體抗體IgG
TSHR(CT)/FITC 熒光標記促狀腺受體抗體（C端）IgG
TSHR /FITC 熒光標記促狀腺受體抗體IgG
TSHR(NT)/FITC 熒光標記促狀腺受體抗體（N端）IgG
TSH/FITC 熒光標記促狀腺抗體IgG

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PI3Kδ抑制劑(ZSTK474)

英文名稱：ZSTK474

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

匍匐曲霉原變種Enterococcus sacchrolyticus大鼠甲狀旁腺激(PTH)  

靈芝屬Enterococcus mundtii大鼠組(HIS)

葡萄座腔菌Enterococcus faecalis大鼠組(HIS)

委內(nèi)瑞鏈霉菌Enterococcus durans大鼠白介13(IL-13)

土曲霉原變種Enterococcus hirae大鼠白介13(IL-13)

枯草芽孢桿菌Enterococcus solitarius大鼠白介15(IL-15)

土生空團菌*Enterococcus malodoratus大鼠白介15(IL-15)

大豆慢生根瘤菌Tetragenococcus halophilus大鼠白介16(IL-16)

金黃色葡萄球菌Lysinibacillus sphaericus大鼠白介16(IL-16)

大腸桿菌Lysinibacillus sphaericus大鼠白介17(IL-17)

變化考克氏菌Bacillus cereus大鼠白介17(IL-17)

釀酒酵母Lysinibacillus sphaericus大鼠白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)

茄勞爾氏菌Bacillus pumilus大鼠白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)

pTRV 2Bacillus globisporus大鼠可溶性E選擇(sE-selectin)

魚蛉假絲酵母Bacillus licheniformis大鼠可溶性E選擇(sE-selectin)

湖北擬酵母Bacillus licheniformis大鼠白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)

視黃受體應(yīng)答蛋白3抗體解糖熱纖維菌屬柱狀假絲酵母菌

視黃受體應(yīng)答蛋白1抗體致黑脫硫腸狀菌錐毛殼屬

Rad52抗體地下熱袍菌Pannonibacter phragmitetus

抑癌基因Rbms3抗體萊廷格熱袍菌Paenibacillus dauci
PI3Kδ抑制劑(ZSTK474)米曲霉 鷹嘴豆芽A

皂味口磨* 十二烷基吡喃葡萄糖苷

蘇云金芽孢桿漢城亞種 荷葉堿

淡紫擬青霉 側(cè)金盞花

毛柄(金針菇) 橙黃決明

釀酒酵母 大豆異黃酮

櫟生青霉 光甘草定

米根霉 鹽酸石蒜堿

大腸埃希氏 焦磷酸鈉

短小芽孢桿 9-甲氧基

赫氏埃希氏 L-乳酸鎂

劍 2"-O-沒食子?；鸾z桃苷

亞洲水鹽單胞 酮酸鈣

布氏假單胞 D-葡萄糖酸鈉

木霉 大薊苷