B-Raf和c-Raf抑制劑（B-Raf IN 1）

B-Raf和c-Raf抑制劑（B-Raf IN 1）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-TGF- Beta1/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記TGF-β1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG) 髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(抗原)Multi-class antibod

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

小鼠左右決定因子2(LEFTY2)ELISA試劑盒 ，英文名： LEFTY2 ELISA Kit

鴨白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin2,IL-2ELISAkit 96T/48T

犬誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫試劑盒 Dog inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA Kit

英文名稱MouseCXCL12ELISAKit小鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子12(CXCL12)規(guī)格：96T/48T

冰凍切片組織線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

RatFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISA試劑盒大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素35(IL-35)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat heat shock factor 1 (HSF1) ELISA Kit 大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒

Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit 人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

HumanCalretinin,CRELISA試劑盒人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞克隆凍存試劑盒50次

Humansolubleierleukin-1receptorⅠ，IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human lipid peroxide / lactoperoxidase (LPO) ELISA Kit 人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒

RabbitThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 兔纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforApo-E(MouseApolipoproteinE)ELISAKit小鼠載脂蛋白E規(guī)格：48T/96T

溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)溶液(1毫摩爾)1毫升

PorcineMelatonin,MTELISAKit豬褪黑素(MT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
B-Raf和c-Raf抑制劑（B-Raf IN 1）ZnT-1 英文名稱： 鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 0.2ml

DHRS2 英文名稱： 脫氫酶/還原酶家族成員2抗體 0.1ml

磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體 Anti-phospho-APP 0.1ml

Anti-AFP/Biotin 生物素化鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-eNOS(Ser1177) 磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內(nèi)皮型) 規(guī)格 0.1ml

E2F1 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg