產(chǎn)品屬性:
中文名稱:微管蛋白抑制劑(MMAD hydrochloride)
英文名稱:MMAD hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
MMAD鹽酸鹽是微管蛋白強(qiáng)效抑制劑,能在抗體藥物偶連體中(ADCs)作為細(xì)胞毒素分子。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:173441-26-4 別名:Demethyldolastatin 10 hydrochloride;Monomethylauristatin D hydrochloride;Monomethyl Dolastatin 10 hydrochloride 分子量:807.53 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
三碘狀腺原(T3)ELISA Kit英文名稱:T3 ELISA Kit二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移4抗體包裝100g
乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA Kit英文名稱:LF/LTF ELISA KitAKIRIN2蛋白抗體包裝25g
乳脫氫(LDH)ELISA Kit英文名稱:LDH ELISA KitADP核糖基化樣因子8B抗體包裝5g
溶菌(LZM)ELISA Kit英文名稱:LZM ELISA Kit三磷腺苷家族蛋白2抗體包裝1g
絨毛膜促性腺激β(β-CG)ELISA Kit英文名稱:β-CG ELISA KitAKIRIN1蛋白抗體包裝5g
絨毛膜促性腺激(CG)ELISA Kit英文名稱:CG ELISA Kit錨定蛋白樣蛋白1抗體包裝1g
妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA Kit英文名稱:PAPP-A ELISA Kit腺苷激2抗體包裝5g
熱休克因子1(HSF1)ELISA Kit英文名稱:HSF1 ELISA Kit頂體前體蛋白抗體包裝1g
熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA Kit英文名稱:HSP gp96 ELISA Kit黑色瘤缺失樣蛋白1抗體包裝5g
熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA Kit英文名稱:HSP-90 ELISA Kit未知糖基化轉(zhuǎn)移AER61抗體包裝100g
熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit英文名稱:HSP-70 ELISA Kit鐵蛋白Fe65抗體包裝25g
熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA Kit英文名稱:Hsp-60 ELISA Kit抑癌基因ras同源家族1抗體包裝5g
熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA Kit英文名稱:Hsp-40 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體包裝100g
熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA Kit英文名稱:HSP-27 ELISA Kit心鈉抗體包裝25g
熱休克蛋白20(Hsp-20)ELISA Kit英文名稱:Hsp-20 ELISA Kit酰tRNA合成2抗體包裝1g
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體纖維蛋白原(FG)BIX02188 是一種有效的選擇性 MEK5 抑制劑,IC50 為 4.3 nM。 BIX02188 也選擇性抑制 ERK5 活性, IC50 為 810 n
微管蛋白抑制劑(MMAD hydrochloride)十二氫角鯊烯
叔丁乙烯
雙異
順式-1,3-戊二烯
順式-2-己烯
順式-3-己烯
順式-9-二十三烯
順式均二代乙烯
四硫富瓦烯
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)