Src家族抑制劑(PP1)

Src家族抑制劑(PP1)公司正在出售的產(chǎn)品：DCN/FITC 熒光標(biāo)記抗核心蛋白聚糖抗體IgG橡膠PTFE墊片,配套120ZSS棕色瓶,φ20mm*1.4mm
DCP/FITC 熒光標(biāo)記異常凝血原/脫-γ-羧凝血原抗體IgG中空純四氟塞,配套120ZSS玻璃瓶,φ18*18
DCP /HRP 辣根過氧化物標(biāo)記異常凝血原/脫-γ-羧凝血原抗體IgG橡膠覆PTFE墊片,匹配30Zss黑色低蓋,

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

假單胞菌大鼠二氧化Anti-MAPKAPK3 Antibody人腎(Renin)

平流層芽孢桿菌小鼠抗紅抗體Anti-MARCH2 Antibody人腎(Renin)

糞腸球菌麻疹病 IgG（間接法二步法）Anti-MARCH3 Antibody人腎上腺(EPI)

紅球菌麻疹病 IgM（間接法二步法）Anti-MARCH4 Antibody人腎上腺(EPI)

青霉屬柯薩奇病 IgG 混合型（間接法二步法）Anti-MARCH3 Antibody人雌二受體(ER)

布魯氏菌柯薩奇病 IgM 混合型(間接法二步法)Anti-MARCH5 Antibody人雌二受體(ER)

藤黃微球菌柯薩奇病 IgG Ⅰ(間接法二步法)Anti-MARCKS Antibody人甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)

貪噬菌柯薩奇病 IgM Ⅰ(間接法二步法)Anti-MARK1 Antibody人甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)

葉生布勒擔(dān)子酵母柯薩奇病 IgG Ⅱ(間接法二步法)Anti-MARK3 Antibody人血管緊張?jiān)?aGT)

平菇柯薩奇病 IgG Ⅲ(間接法二步法)Anti-MARCKS Antibody人血管緊張?jiān)?aGT)

范巴倫氏分支桿菌柯薩奇病 IgG Ⅳ(間接法二步法)Anti-MAS1 Antibody人血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)

蘋果黑腐皮殼柯薩奇病 IgG ⅤAnti-MARK4 Antibody人血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)

淺白隱球酵母柯薩奇病 IgG Ⅵ(間接法二步法)Anti-MAST2 Antibody人卵泡抑(FS)

大腸埃希氏桿菌合胞病 IgG(間接法二步法)Anti-MAST4 Antibody人卵泡抑(FS)

蠟狀芽孢桿菌合胞病 IgM(間接法二步法)Anti-MASTL Antibody人甲狀腺抗體(TAb)

魯氏接合酵母艾柯病 IgG(間接法二步法)Anti-MASTL Antibody人甲狀腺抗體(TAb)

Notch轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白RBPJK抗體細(xì)黃鏈霉菌鼠頰黏膜鱗癌細(xì)胞

核糖核抑制因子1抗體藤黃色鏈霉菌人纖維肉瘤細(xì)胞系

環(huán)指蛋白41抗體吸水鏈霉菌人直腸癌腫瘤工程細(xì)胞

絲羧肽1抗體灰色鏈霉菌人乳腺癌腫瘤工程細(xì)胞
Src家族抑制劑(PP1)皮落青霉 咖啡酸樺木酯

綠產(chǎn)色鏈霉 Bauerenol acetate

靈芝 Barpisoflavone A

表皮葡萄球 馬兜鈴內(nèi)酰 FI

橄欖色盾殼霉 Aristolactam BII

釀酒酵母 Annonacin

靈芝 Anhydroglycinol

根霉屬 當(dāng)歸堿

米根霉 Alpinumisoflavone acetate

大腸埃希 貓尾草異黃酮

大豆慢生根瘤 麥珠子酸

維及尼鏈霉 澤瀉

中國蜜環(huán) Acantrifoside E

平田頭菇 9β,13β-Epidioxyabiet-8(14)-en-18

大腸埃希 9-Oxoageraphorone