ERK1，ERK2抑制劑(VRT752271)

ERK1，ERK2抑制劑(VRT752271)公司*的產(chǎn)品：arfaptin 2(phospho S260) /FITC 熒光標(biāo)記化ADP核糖化因子結(jié)合蛋白2抗體IgG無水硫鈉 CP,98%
ARHI/FITC 熒光標(biāo)記ARHI蛋白抗體IgG無水硫鈉 SP
ARIP2a/FITC 熒光標(biāo)記激活受體2A/激活受體相互作用蛋白2a抗體IgG硫標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.2500mol/L(0.5N)
A

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：ERK1，ERK2抑制劑(VRT752271)

英文名稱：VRT752271

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

黃褐牛肝菌cRaf/Raf1抗原Anti-CDY1 AntibodyN-去乙?；?磺基轉(zhuǎn)移3(NDST3)

銅綠假單胞菌MEK1/MAPKK1抗體(N-端)Anti-CDYL2 AntibodyN-去乙?；?磺基轉(zhuǎn)移2(NDST2)

狹旋毛殼促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子Anti-CEACAM21 AntibodyN-去乙?；?磺基轉(zhuǎn)移1(NDST1)

樟疫霉衰老抑制基因抗原Anti-CEBP Delta AntibodyN-聚糖1(NGLY1)

環(huán)形凸臍蠕孢環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原Anti-CEBPD AntibodyN-甲酰甲硫(FMET)

人纖維單胞菌降鈣抗原Anti-CEBPD AntibodyN-甲基DNA糖基化(MPG)

產(chǎn)氣莢膜梭菌       C型C端結(jié)合蛋白1抗原Anti-CEBPE Antibody人心鈉肽(ANP)聯(lián)免疫試劑盒

釀酒酵母淋巴相關(guān)抗原4/性T抗原-4Anti-CEBPE Antibody人心鈉肽(ANP)聯(lián)免疫試劑盒

鹽反硝化枝芽孢桿菌 心肌肌鈣蛋白Anti-CEBPZ Antibody人IL-17

大腸桿菌間隙連接蛋白32抗原Anti-CELA3B Antibody人IL-17

雷丸*間隙連接蛋白36抗原Anti-CEBPG Antibody人原鈣黏1(PCDH1)

枯草芽孢桿菌間隙連接蛋白40(多肽)Anti-CELSR1 Antibody人原鈣黏1(PCDH1)

灰色鏈霉菌趨化因子(C-X3-C 基元)配體1抗原Anti-CELF1 Antibody人白介2受體(IL-2R)

楊奇青霉CX3C趨化因子受體1抗原Anti-CELSR2 Antibody人白介2受體(IL-2R)

蘇云金芽孢桿菌周期A抗原Anti-CELSR3/Flamingo homolog 1 Antibody人皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)

皺瓣革菌周期B1抗原Anti-CELSR3 Antibody人皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)

核糖核結(jié)合蛋白1抗體脫硫弧菌脫硫亞種（脫硫微螺菌、脫硫螺菌、脫硫桿菌、脫硫芽孢弧菌、脫硫弧菌）人急性BT淋巴細(xì)胞白血病

PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白GOPC抗體厭氧消化鏈球菌小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞

B淋巴細(xì)胞受體相關(guān)蛋白抗體長野解普魯蘭桿菌人胃癌細(xì)胞（2013年新引進(jìn)）（干細(xì)胞庫保藏）

睪丸特異性核苷果糖β抗體Pseudomonastoyotomiensis小鼠骨髓瘤細(xì)胞
ERK1，ERK2抑制劑(VRT752271)兩面神 Garcinexanthone A

蟬花 Furowanin A

膠孢 Fuegin

堅(jiān)強(qiáng)芽胞桿 Fraxamoside

裂褶 Floribundone 1

大腸埃希氏 Fargesone B

擬莖點(diǎn)霉 桉樹腦

細(xì)孢毛霉 Erysubin B

銅綠假單胞 Epimedokoreanin B

茶樹菇 ent-Labda-8(17),13-dien-16,15-ol

乳桿屬 ent-11,16-Epoxy-15-hydroxykauran

Pilidium concavum Drimiopsin D

沼澤紅菇 Drimiopsin C

UNNASH/DF-1  Dregeoside Ga1

褶輪枝 Dregeoside Da1 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)