公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:U373MG細(xì)胞抑制劑(Ecteinascidin 770)
英文名稱:Ecteinascidin 770
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Ecteinascidin770(ET-770)是具有抗癌活性的1,2,3,4-四氫異喹啉生物堿,抑制U373MG cells的IC50值為4.83nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):114899-80-8 別名:Ecteinascidine 770;Et-770 純度:98.82% 分子量:770.85 儲(chǔ)存條件:4℃,存于氬氣中。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
尿激型纖溶原激活物(uPA)ELISA Kit英文名稱:uPA ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體包裝5g
內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)ELISA Kit英文名稱:visfatin ELISA Kit胎蛋白抗體包裝1g
內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑(vaspin)ELISA Kit英文名稱:vaspin ELISA Kit毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體包裝5g
內(nèi)皮脂肪(EL)ELISA Kit英文名稱:EL ELISA KitATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝5MG
內(nèi)皮型一氧化氮合3(eNOS-3)ELISA Kit英文名稱:eNOS-3 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體包裝100ml
內(nèi)皮型一氧化氮合(eNOS)ELISA Kit英文名稱:eNOS ELISA Kit性鈣調(diào)蛋白3抗體包裝10MG
內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)ELISA Kit英文名稱:eNOS-3 ELISA Kit磷化CD156b抗體包裝1g
內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)ELISA Kit英文名稱:eNOS ELISA Kit乙脫氫5抗體包裝25g
內(nèi)皮1(ET-1)ELISA Kit英文名稱:ET-1 ELISA Kit乙脫氫6抗體包裝5g
內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA Kit英文名稱:EG-VEGF ELISA Kit溶血磷脂?;D(zhuǎn)移5抗體包裝1g
內(nèi)毒(ET)ELISA Kit英文名稱:ET ELISA Kit遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體包裝5g
腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA Kit英文名稱:BDNF ELISA Kit免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體包裝250mg
腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)ELISA Kit英文名稱:BDNF ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝200mg
腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)ELISA Kit英文名稱:BNP ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝5g
腦紅蛋白(NGB)ELISA Kit英文名稱:NGB ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝25g
凋亡相關(guān)蛋白3抗體免疫球蛋白G(IgG)Nintedanib (BIBF 1120) is a potent triple angiokinase inhibitor for VEGFR1/2/3,
U373MG細(xì)胞抑制劑(Ecteinascidin 770)食道癌抑制生長(zhǎng)蛋白抗體2-金剛烷 ADAMANTANONE, 2-(SG)Human, Mouse, Rat
RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體1-金剛 ADAMANTANOL, 1-(SG)Human, Mouse, Rat
雄激受體相關(guān)蛋白24抗體仙鶴草酚 B AGRIMOL B(P)Human, Mouse, Rat
癌因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab25抗體歐夾竹桃苷乙 ADYNERIN(P)Human, Mouse
核受體RXRβ抗體歐夾竹桃苷乙 ADYNERIN(P)Human, Mouse
維受體γ抗體歐夾竹桃苷乙 ADYNERIN(P)Human
磷化Rho相關(guān)蛋白激1抗體上腺雄甾 ADRENOSTERONE(RG)Human
視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白P48抗體上腺紅 ADRENOCHROME(RG)Human
神經(jīng)元突觸膜結(jié)合蛋白2抗體L-(-)-上腺 EPINEPHRINE, R-(-)-(RG)Human, Mouse, Rat