PC-PLC抑制劑（SPK-601）

PC-PLC抑制劑（SPK-601）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser933)/FITC 熒光素標記磷酸化細胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-WDR26/FITC 熒光素標記Gβ類似蛋白WDR26抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

蒿（標準品）英文名稱： 3,4-Dimethoxycinnamic acid磷化離子通道蛋白Kv3.1抗體包裝1g

蒿乙英文名稱： Cefodizime sodium周期基因1蛋白抗體包裝25g

訶子（標準品）英文名稱： Cefdinir驅(qū)動蛋白KIF5B抗體包裝5g

訶子林鞣(標準品)英文名稱： Boc-D-Glutamine kelch樣蛋白13抗體包裝1g

訶子鞣質(zhì),訶子鞣英文名稱： Gibberllin A4+7鈣激活通道蛋白3抗體包裝5g

合歡花（標準品）英文名稱： CH5424802 腎臟和腦蛋白抗體包裝25g

合歡皮（標準品）英文名稱： p-Methoxycinnamic acid 有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2B抗體包裝5g

何首烏（標準品）英文名稱： Serotonin hydrochloride(5-HT)kelch樣蛋白9抗體包裝25g

和厚樸酚(標準品)英文名稱： Ingenol 驅(qū)動蛋白家族成員15抗體包裝5g

荷葉（標準品）英文名稱： β-Amyrin 著絲點關(guān)聯(lián)蛋白1抗體包裝1g

荷葉堿（標準品）英文名稱： Cefsulodine sodiumkelch樣蛋白5抗體包裝5g

鶴慶五味子癸英文名稱： o-Phthalaldehyde驅(qū)動蛋白家族成員C1抗體包裝25g

鶴慶五味子辛英文名稱： Melengestrol acetateKelch樣蛋白22抗體包裝5g

鶴虱（標準品）英文名稱： Cholesterol esterase 電壓門控通道Kv4.1抗體包裝1g

黑豆（標準品）英文名稱： SP600125敏感離子通道蛋白3抗體包裝5g

嗜熱鐵質(zhì)菌Ferroplasma│thermophilium 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BR抗胃壁抗體試劑盒L-谷;L-Glutamic aci

毛霉Mucor│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量測定抗尾狀核試劑盒格列風內(nèi)酯;Griffonilide

刺孢小克銀漢霉原變種Cunninghamella│echinulata var. echinulata 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)抗網(wǎng)硬蛋白抗體試劑盒廣防風苷A;Epimeredinosid
PC-PLC抑制劑（SPK-601）遠志口山；遠志山III(標準品)Human, Mouse

遠志-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷Human

遠志（標準品）Human, Mouse

遠志皂苷B(標準品)Human, Mouse

遠志皂苷B（標準品）Human, Mouse, Rat

遠志皂苷元(標準品)Human, Mouse

月桂烯（香葉烯）Human

月見草油（標準品）Human

云實皮（標準品）Human, Mouse