細(xì)胞核染料DAPI

細(xì)胞核染料DAPI公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-PDGF Receptor alpha(Tyr849)/PDGF Receptor beta (Tyr857) 化血小板源性生長因子受體α/β抗體二叔丁 99%
PDGF Receptor beta/PDGF-R-B 血小板源性生長因子受體-B抗體二單己 98%
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009)

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

波棱英文名稱： C12E8Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝100ml

博落回（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Calcium florideFas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝25ml

薄荷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Calcium stearateF-box蛋白21抗體包裝100g

補(bǔ)骨脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cedar wood oilGATA結(jié)合蛋白1伴侶蛋白抗體包裝25g

補(bǔ)骨脂定（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cerium(III) sulfate, octahydrate胎球蛋白B/Fetuin β抗體包裝5g

補(bǔ)骨脂二氫黃;補(bǔ)骨脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Chromium (III) oxide叉頭蛋白O1抗體包裝25g

補(bǔ)骨脂二氫黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cobalt (II, III ) oxide鐵蛋白重鏈抗體包裝5g

補(bǔ)骨脂酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Cobaltous acetate, tetrahydrate類固受體復(fù)合物蛋白FKBP5抗體包裝5g

補(bǔ)骨脂寧;補(bǔ)骨脂異黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Cobaltous powder纖維性鞘結(jié)合蛋白1抗體包裝100g

補(bǔ)骨脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Copper powder纖維生長因子結(jié)合蛋白2抗體包裝25g

布渣葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Copper(II) carbonate basic肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin3抗體包裝25mg

菜油甾英文名稱： Copper(II) oxide結(jié)構(gòu)特異性核FEN1抗體包裝100g

參麥提取物（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Copper(II) pyrophosphateFAM61B蛋白抗體包裝500g

蠶沙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Copper(II) tartrate, trihydrateFAM63A蛋白抗體包裝100mg

蒼耳亭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： dADP上皮分泌型FAM3C蛋白抗體包裝500mg

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)嗜肺軍團(tuán)菌抗原試劑盒去基雛葉龍膽;Tetrahydrox

副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品視黃羥基異亮;4-Hydroxyisol

0大腸桿菌克菌株Escherichia coli 0 質(zhì)量規(guī)格：>99%,VEGFR 抑制劑,培養(yǎng)級(jí)食欲受體試劑盒去氫松香;Dehydroabietlc
細(xì)胞核染料DAPI匍枝根霉(黑根霉) 3-氯-2-氟苯甲包柔氏螺旋體Elisa

柳松菇 5-溴-2,3-二氟苯甲MBD3Elisa

波狀曲霉 2-溴-6-氟苯甲核纖層蛋白B2Elisa

果香地霉 2-氯-5-氟異煙酸發(fā)育調(diào)節(jié)GTP結(jié)合蛋白2Elisa

表皮葡萄球 托麥汀N-myc下游調(diào)節(jié)基因2Elisa

孟氏假單胞 2-溴吡啶-4-甲酸甲酯酮酸脫氫E2Elisa

靈芝 反-1,4-二氨基環(huán)已烷CD209分子Elisa

海南小雙孢 苯二酸胸苷激1Elisa

庫德里阿茲威畢赤酵母 2,3-二溴-6-甲基吡啶丁型肝炎IgM抗體Elisa

尖孢鐮刀胡麻?；?/span> 3-溴噻酚-2-羧酸甲酯白介36αElisa

中慢生華癸根瘤 3-氯-2,4-二氟苯白介36βElisa

Ochrobactrum 2-氟-4-煙酸血管內(nèi)皮生長因子受體2Elisa

米曲霉 2-正基烷-1,3-二抗肌炎抗體譜3抗體IgGElisa

節(jié)桿屬 1-甲基-4-硝基-1H-吲唑內(nèi)皮脂肪Elisa

食砜節(jié)桿 5-甲氧基水楊酸酪蛋白激2Elisa