PI3K和mTOR抑制劑(NSC781406)

PI3K和mTOR抑制劑(NSC781406)公司*的產(chǎn)品：Anti-LN /FITC 熒光素標(biāo)記層粘連蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Syntrophins/SNTA1/Syntrophin α1/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)肌肉接頭蛋白SNTA1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus an

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PI3K和mTOR抑制劑(NSC781406)

英文名稱：NSC781406

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒 ，英文名： LBP ELISA Kit

猴子巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA檢測試劑盒MonkeyMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit 96T/48T

犬葡萄糖-6-磷酸酶(G6PC)免疫試劑盒 Dog Glucose-6-phosphatase,G6PC ELISA kit

英文名稱HumanAmylinELISAKit人胰淀素(Amylin)規(guī)格：96T/48T

純化大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達載體(pGEFP-AM)10微克

RatHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat neuroophin 4 (-4) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒

HumanOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 人骨保護素配體(OPGL)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISA試劑盒人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)GT73品系基因檢測試劑盒20次

humansimilaoRIKENcDNA4931408D14geneELISAKit人類似RIKENcDNA4931408D14基因ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human tuberculosis aibody IgG (TB-Ab IgG) ELISA Kit 人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)ELISA試劑盒

PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforAlpha-EP(HumanAlpha-Endomorphin)ELISAKit人α-內(nèi)肽規(guī)格：48T/96T

血液精氨酸(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次

Phaseolusvulgarisagglinin,PHAELISAKit菜豆凝集素(PHA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
PI3K和mTOR抑制劑(NSC781406)Sulfatase 2 英文名稱： 酯酶2蛋白抗體 0.2ml

Fbx15 英文名稱： Fbx15蛋白抗體 0.2ml

髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體 Anti-MAG-a/b 0.1ml

Anti-RGS2/FITC 熒光素標(biāo)記G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PKA R2 (Ser96) 磷酸化蛋白激酶A受體2α亞基抗體 規(guī)格 0.1ml

IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長因子-I(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)