商品介紹:
DHBP dibromide是鈣離子釋放的抑制劑和肌肉松弛劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):6159-05-3 別名:Diheptylviologen dibromide 純度:99.56% 分子量:514.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:鈣離子釋抑制劑(DHBP dibromide)
英文名稱:DHBP dibromide
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
5-羥色鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium bicarbonate轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體包裝500g
6'''-阿魏酰斯皮諾英文名稱: Sodium dodecanesulfonate內(nèi)皮受體蛋白酪激抗體包裝250mg
6''-O-二?;玖夏拒沼⑽拿Q: Theophylline酪蛋白激受體B2抗體包裝1g
6''-二沙苑子苷單酯英文名稱: Cellulase磷化雌激受體ER alpha 抗體包裝5g
6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷英文名稱: Chondroitin sulfate重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體包裝25ml
6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷英文名稱: Isonicotinic acid雌激受體α抗體(用于western blot)包裝5ml
6,7,4'-三羥基異黃英文名稱: L-Malic acid雌激受體α/β抗體包裝25g
6-氧基二氫血根堿英文名稱: Proteinase K Solution, 20 mg/ml自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體包裝5g
6-氧基山柰酚-3-O-蕓香糖苷英文名稱: Poly-L-lysine solution ( 0.1%)酪蛋白激A3受體抗體包裝100ml
6-姜酚(姜辣)英文名稱: Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterileEHM2蛋白抗體包裝1g
6-姜烯酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Glucose-6-phosphate, disodium, dihydrate磷化真核翻譯起始因子4E抗體包裝1g
6-羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium succinate翻譯延伸因子EF-1a抗體包裝5g
6-基異麥冬黃烷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hemoglobin磷化雌激受體α抗體包裝1g
7,4'-二羥基黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PEG 10000磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝1g
7,8-二氫生物蝶呤英文名稱: DL-Malic acid磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5g
: =JCM3170=ATCC27875=CBS420.74=CECT3304=DSM4資源名稱: 披發(fā)糖多孢菌披發(fā)亞種 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品髓性核分化抗原試劑盒肉豆蔻;Myristicin
瓦克青霉Penicillium│waksmanii 質(zhì)量規(guī)格:純度大于99%,R構(gòu)型髓系觸發(fā)受體-1試劑盒忍冬苷;Lonicerin
: =ATCCBAA-482=CCM7143=CIP106688=DSM15638=NC資源名稱: 低溫乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體試劑盒日蟾蜍他靈;Gamabufotalin
鈣離子釋抑制劑(DHBP dibromide)鋅指蛋白516抗體6-羥-7-氧-4-(黃檀) DALBERGIN(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白750抗體豆苷 DAIDZIN(RG)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白744抗體豆苷 DAIDZIN(RG)Human, Mouse, Rat
鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8蛋白抗體豆苷 DAIDZIN(RG)Human
鋅指蛋白852抗體豆苷 DAIDZIN(AS)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白503抗體DEACETYL-7-XYLOSYLCEPHALOMANNINE, 10-(RG)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白672抗體7-木糖甙-10-脫乙酰紫杉 DEACETYL-7-XYLOTAXOL, 10-(P)Human, Mouse
鋅指蛋白198抗體7-木糖甙-10-脫乙酰紫杉 DEACETYL-7-XYLOTAXOL, 10-(P)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白323抗體10-去乙酰紫杉 DEACETYLTAXOL, 10-(P)Human, Rat