Akt抑制劑(PF-AKT400)

Akt抑制劑(PF-AKT400)公司*的產(chǎn)品：OAT-3/FITC 熒光標(biāo)記陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3抗體IgG硫代硫鈉，五水 ACS, 99.5%
OAT4L/URAT1 /FITC 熒光標(biāo)記尿鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體IgG氫二鈉，十二水 AR，99%
obestatin/Ghrelin/GHRP /FITC 熒光標(biāo)記肥胖抑制抗體IgG辛鈉 99%
OCLN(Occluding)/FITC

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Akt抑制劑(PF-AKT400)

英文名稱：PF-AKT400

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

運(yùn)動?xùn)|秀珠氏菌人鈣聯(lián)蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β萘(β-Nph)

竹黃*人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)

賴芽孢桿菌人βBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)

鼠乳桿菌人胎球蛋白ABacillus subtilis subsp. subtilis小鼠(AZT)

釀酒酵母人胎盤核糖核抑止劑Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠(AZT)

小馬勃人胎盤蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β葡糖苷(β-glucosidase)

可可毛色二孢菌人胎盤催乳Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β葡糖苷(β-glucosidase)

紫穗槐根瘤菌人胎兒血紅蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠多巴(DA)

藤黃微球菌人抗巨病抗體IgMBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠多巴(DA)

不解糖單胞菌人抗弓形體IgM抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)

黃柄籠頭菌人抗風(fēng)疹病IgG抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)

擬莖點(diǎn)霉人抗EB病抗體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠高敏甲狀腺(u-T4)

假紅桿菌屬人孕受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠高敏甲狀腺(u-T4)

多根硬皮馬勃人新生兒促甲狀腺Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β葡萄糖苷(βGD)

巨孢犁頭霉人特異性β1糖蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β葡萄糖苷(βGD)

Bionectria 人胎盤泌乳Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)

鋅指蛋白146抗體炭球菌秋行軍蟲卵巢細(xì)胞Sf9克株

乳腺癌相關(guān)基因2抗體鋅指蛋白364杏鮑菇牛trim5α基因沉默細(xì)胞株

細(xì)胞周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體金龜子綠僵菌幼倉鼠腎傳代細(xì)胞

鋅指蛋白420抗體白僵菌永生化滇西亞種樹鼩肝細(xì)胞
Akt抑制劑(PF-AKT400)Microbacterium oxydans 阿多尼弗林堿

大腸埃希 旱蓮苷A

香菇 紫蘇烯

黃色毛霉 苦蒿

栗生灰黑孔 異硫酸玫瑰紅B

狹窄革 麗春紅2R

細(xì)鏈格孢 西瑞香

釀酒酵母 白果酸

枯草芽孢桿 白果新酸

聚生殼 平貝堿甲

韋臘鏈霉 麗春紅S

東京根霉 廣藿香酮

鏈格孢（可訂購） 油紅O

密叢毛霉 石斛

海南布勒擔(dān)子酵母 曙紅Y(溶)