產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CDK7抑制劑(LDC4297)
英文名稱:LDC4297
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
LDC4297是高效和選擇性的CDK7抑制劑,IC50值為0.13nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1453834-21-3 純度:99.14% 分子量:432.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷英文名稱: Ponceau 2RA型流感病H3N2-M2蛋白抗體包裝1g
6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷英文名稱: Rose bengalHSH2D抗體包裝250mg
6,7,4'-三羥基異黃英文名稱: Azophloxine蛭抗體包裝25g
6-氧基二氫血根堿英文名稱: Eosin Y ,alcohol solution白抗原A抗體包裝5g
6-氧基山柰酚-3-O-蕓香糖苷英文名稱: Eosin B人瘤病16型E7抗體包裝1g
6-姜酚(姜辣)英文名稱: Fast Garnet GBC Salt人類狀瘤病58 E6蛋白抗體包裝5g
6-姜烯酚(標準品)英文名稱: Fast Red 3 GL Salt人類狀瘤病16抗體包裝100g
6-羥基(標準品)英文名稱: Fast Red KL Salt人類狀瘤病18 E7抗體包裝25g
6-基異麥冬黃烷A(標準品)英文名稱: Fast Red B Salt人類狀瘤病31 E7抗體包裝5g
7,4'-二羥基黃(標準品)英文名稱: Fast Red TR Salt 1,5-naphthalenedisulfonate salt轉(zhuǎn)錄因子HES2抗體包裝1g
7,8-二氫生物蝶呤英文名稱: Ponceau S轉(zhuǎn)錄因子HES3抗體包裝5g
7-O-基蘆薈新甙A(標準品)英文名稱: Ciprofibrate多磷肌激IPMK抗體包裝1g
7-O-基芒果苷(標準品)英文名稱: Eosin Y water solutionIKK復(fù)合物相關(guān)蛋白抗體包裝5g
7-O-乙基莫諾苷英文名稱: Azocarmine BIQSEC2抗體包裝100g
7-表紫杉(標準品)英文名稱: Azocarmine G交叉蛋白2抗體包裝25g
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR淋巴趨化因子試劑盒基黃連堿;Worenine chlor
蒼白彎孢Curvularia│pallescens 質(zhì)量規(guī)格:>98%,反式,BR淋巴抗原6復(fù)合物基因座A試劑盒吉馬;Germacrone
大島芽孢桿菌Bacillus│oshimensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR淋巴功能相關(guān)抗原3試劑盒劍麻皂苷元;Tigogenin
CDK7抑制劑(LDC4297)熒光APC標記胰糜蛋白鳳仙萜四苷CHuman, Mouse
熒光Cy3標記鏈霉親和鳳仙萜四苷FHuman, Mouse, Rat
熒光Cy3標記親合鳳仙萜四苷GHuman
Cy3標記蛋白A鳳仙萜四苷KHuman, Mouse
熒光Cy3標記兔IgG(流式同型對照)鳳仙萜四苷MHuman, Mouse
熒光Cy3標記小鼠IgG(流式同型對照)佛手(標準品)Human
熒光Cy3標記羊IgG(流式同型對照)佛手柑內(nèi)酯(標準品)Human, Mouse
熒光Cy3標記大鼠IgG(流式同型對照)佛手柑;香檸檬;佛手柑亭;香檸檬亭(標準品)Human
熒光Cy3標記牛IgG佛司可林(標準品)Human, Mouse
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)