K-252B(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑

K-252B(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-IL-17RB/FITC 熒光素標記白介素-17B受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-RAD51C/FITC 熒光素標記癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh APC5 細胞

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

三叔丁（標準品）英文名稱： Oil red O/Solvent Red 27 抑癌蛋白DKK1抗體包裝5g

三蔗糖（標準品）英文名稱： Sudan red G/Solvent Red 1膜轉(zhuǎn)運蛋白DISPA抗體包裝1g

三葉豆紫檀苷(標準品)英文名稱： Sudan Black B /Solvent Black 3DIRAS2蛋白抗體包裝250mg

桑皮苷A（標準品）英文名稱： Sudan Red B/Solvent Red 25DDX58抗體包裝1g

色甘鈉（標準品）英文名稱： Sudan Red 7B/Solvent Red 19DDX4抗體包裝25g

沙蟾精(標準品)英文名稱： Sudan Blue II/Solvent Blue 35鴨瘟病DPV抗體包裝5g

沙?。藴势罚┯⑽拿Q： Methyl red交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體包裝25ml

沙利度(標準品)英文名稱： m-Methyl red腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5ml

山梨（標準品）英文名稱： Methyl Red sodium saltDNA斷裂因子抗體（蛋白激活脫氧核糖核）包裝1g

山梨（標準品）英文名稱： Cinoxacin脫氧核糖核γ抗體包裝5g

麝香草酚（標準品）英文名稱： Norandrostenedione死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝100g

腎上腺色腙（卡巴克洛）標準品英文名稱： Dapagliflozin propanediol hydrate脫氧核糖核1抗體包裝25g

生物（標準品）英文名稱： Anacetrapib;MK0859脫氧核糖核2抗體包裝1g

十八烷,1-十八(標準品)英文名稱： Dabigatran etexilate死亡防衛(wèi)蛋白1抗體包裝5g

十二烷基硫鈉（標準品）英文名稱： RivaroxabanDuffy血型趨化因子受體抗體包裝25ml

鼠傷寒沙門氏菌Salmonella│typhimurium 質(zhì)量規(guī)格：>3900IU/MG,EP,BR,可用于培養(yǎng)胃動試劑盒酚-4’-葡萄糖苷;Kaempfer

印度洋新鞘菌Novosphingobium│indicum 質(zhì)量規(guī)格：含量測定,標準品胃動蛋白2試劑盒酚-7-葡萄糖苷;Kaempfero

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP 32,BR,可用于培養(yǎng)胃蛋白原II ELISA Kit漿苦味L;Physalin L
K-252B(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑小鼠抗心磷脂抗體IgM11(α)氧柴胡皂苷FHuman, Mouse

大鼠生長抑11-O-羅漢果苷V(標準品)Human, Mouse

人Ⅳ型膠原11-O-異丁酰-12-O-乙酰通關(guān)藤甘元B-3-...Human, Mouse, Rat

大鼠血纖蛋白原11-羥柳杉酚（標準品）Human, Mouse, Rat

小鼠抗心磷脂抗體IgG11-羰-β-乙酰乳香（標準品）Human, Mouse, Rat

人層連蛋白/板層12-EpinapellineHuman

大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α12-O-Tiglylphorbol-13 –isob...Human, Mouse

小鼠apelin 1213-氧-(9E,11E)-十八碳二烯Human, Mouse, Rat

小鼠α干擾14α-羥Sprengerinin CHuman, Mouse, Rat