KT5823(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑

KT5823(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑公司*的產(chǎn)品：Anti-IL-17RD/FITC 熒光素標(biāo)記白介素17受體D抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Rad52/FITC 熒光素標(biāo)記Rad52抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh APC6/CDC16 細(xì)胞分裂周期蛋白

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：KT5823(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑

英文名稱：KT-5823

產(chǎn)品規(guī)格：100μg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

石膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： RivaroxabanDEK癌基因結(jié)合蛋白包裝100g

舒巴坦鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： ApixabanPSD95結(jié)合蛋白1抗體包裝25g

舒巴坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： PerifosinePSD95結(jié)合蛋白2抗體包裝5g

（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Anagrelide hydrochloride PSD95結(jié)合蛋白4抗體包裝25g

舒林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Saquinavir mesylate雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體包裝5g

舒林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vardenafil hydrochloride trihydrate雙特異性磷22抗體包裝100g

舒尼替尼堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vardenafil hydrochloride trihydrateErdj5/DNAJC10蛋白抗體包裝25g

雙環(huán)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bestatin,Ubenimex腫瘤調(diào)亡/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體包裝25ml

雙酚磺銨 (聚酚磺雜質(zhì))（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bestatin,Ubenimex跨膜TMIGD1蛋白抗體包裝5ml

雙脒（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (3,4-Dimethoxyphenyl)acetic acid軸絲中鏈動力蛋白抗體包裝100ml

雙硫化合物（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： PD-0325901軸絲動力蛋白7抗體包裝25ml

雙硫侖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sitaxsentan sodium; TBC-11249; Thelin環(huán)指蛋白19抗體包裝500ml

雙芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sitaxsentan sodium; TBC-11250; Thelinδ-連環(huán)蛋白抗體包裝25g

雙芬（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sitaxsentan sodium; TBC-11251; Thelin防御β2抗體包裝1g

雙芬鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體包裝1g

: =CGMCC1.6765=JCM1233=ATCC29544=BCRC13988=CCUG14558=CDC4562-70資源名稱: 阪崎腸桿菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胃蛋白原I ELISA Kit楊;Salicylic acid

: HBUM80208資源名稱: 絳紅產(chǎn)色小單胞菌 質(zhì)量規(guī)格：>99,BR胃蛋白原C試劑盒石蒜堿;Lycorine

: =ATCCBAA-531=DSM16702=IFO16725=JCM11434=NBRC16725資源名稱: 緩生新鞘菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胃蛋白原A試劑盒山豆根色滿二氫黃Ⅰ;
KT5823(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑小鼠抗中性粒核周抗體5,7,4'-三羥-8-二氫黃(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

人抗鈣蛋白抑抗體5,7-二羥色原Human

兔骨成型蛋白75-O-維斯阿米-4'-O-β-D-呋喃芹糖-...Human, Mouse, Rat

小鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgM5-O-維斯阿米苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

人卵清蛋白特異性IgE5-羥糠（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

人抗核仁纖維蛋白抗體5-羥色（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

小鼠15脂加氧5-羥色鹽鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

大鼠透明質(zhì)6'''-阿魏酰斯皮諾Human, Rat

人系統(tǒng)性紅斑狼瘡6''-O-二酰染料木苷Human, Mouse, Rat 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)