公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:γ-secretase抑制劑(BMS-708163)
英文名稱:BMS-708163
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
BMS-708163是有效的γ-secretase抑制劑,抑制Aβ42和Aβ40的產(chǎn)生,IC50值分別為0.27nM和0.30nM;同時(shí)抑制Notch胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域(NICD)和CYP2C19,IC50值分別為0.84nM和20μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1146699-66-2 別名:Avagacestat 純度:99.93% 分子量:520.89 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大豆慢生根瘤菌抗內(nèi)膜抗原Anti-CHST2 Antibody人可溶性CD38(sCD38)
尖鐮孢內(nèi)皮抑/內(nèi)皮他丁抗原Anti-CHST6 Antibody人可溶性CD38(sCD38)
擬青霉E.coli O6大腸桿菌菌體蛋白Anti-CHST9 Antibody人可溶性CD21(CR2/sCD21)
芽孢桿菌屬普通大腸埃希菌菌體蛋白(致病性)Anti-CHSY1 Antibody人可溶性CD21(CR2/sCD21)
模擬乳粉蠟樣芽胞桿菌質(zhì)控樣品(定量)EphA1-R受體抗原Anti-CHST8 Antibody人可溶性瘦受體(sLR)
側(cè)耳紅生成受體抗原Anti-CIAO3 Antibody人可溶性瘦受體(sLR)
黃綠木霉磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗原Anti-CHSY1 Antibody人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)
絲裂原活化蛋白激抗原Anti-CIB2 Antibody人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)
Au(黑木耳)絲裂原活化蛋白激3抗原Anti-CIDEB Antibody人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)
巧克力色微桿菌絲裂原活化蛋白激4抗原Anti-CIB3 Antibody人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)
Ag13(蘑菇)人磷化雌激受體α多肽抗原Anti-CIT Antibody人單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)
釀酒酵母磷化雌激受體α抗原Anti-CKS1B Antibody人單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)
巴氏葡萄球菌雌激受體α抗原Anti-CKS2 Antibody人白三烯D4(LTD4)
東方伊薩酵母雌激受體α抗原Anti-CKMT2 Antibody人白三烯D4(LTD4)
Methylobacterium雌激受體β抗原Anti-CKS1B Antibody人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)
煙曲霉Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗原Anti-CKS2 Antibody人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)
酪磷PTPδ抗體蛋白酪磷D受體抗體土壤伯克氏菌人食管腺癌細(xì)胞
魚(yú)精蛋白2抗體短乳桿菌人脊索瘤細(xì)胞
豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍(lán)耳病抗體耐放射異常球菌奶牛乳腺上皮細(xì)胞
凋亡相關(guān)蛋白10抗體青春雙歧桿菌人腎小球系膜細(xì)胞
γ-secretase抑制劑(BMS-708163)大腸桿 6-阿魏酰梓
奇異球?qū)?/span> 6-Epiharpagoside
空泡單胞 6-Epiharpagide
小孢根霉須狀變種 6-Deoxy-9α-hydroxycedrodorin
解淀粉芽孢桿 6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranos
蕁麻青霉 6,8-Diprenylorobol
球形賴芽孢桿 5β-Hydroxycostic acid
粗糙脈孢 5α-Hydroxycostic acid
硬水黃桿 5-Hydroxy-1,7-bis(4-hydroxypheny
戊糖乳桿 5'-Demethylaquillochin
堆形艾耳球蟲(chóng) 5-乙酰氧基羅漢松脂二甲
黑球漆斑 5,5'-Dimethoxylariciresinol 4-O-
芽孢桿屬 5-(3-Hydroxypropyl)-7-methoxyben
平菇 4'-O-Methyllicoflavanone
芽孢桿 4'-Demethyl-3,9-dihydroeucomin