PI3K I型抑制劑（NVP-BGT226）

PI3K I型抑制劑（NVP-BGT226）公司正在出售的產(chǎn)品：PLAU/uPA/FITC 熒光標記尿激型纖溶原激活因子抗體IgG
Plectin/FITC 熒光標記網(wǎng)蛋白抗體IgG
PLAUR/uPAR/FITC 熒光標記尿激型纖溶原激活因子受體抗體IgG
Plexin A1/Plexin 1/FITC 熒光標記神經(jīng)叢蛋白A1抗體IgG
Plexin A2/FITC 熒光標記神經(jīng)叢蛋白

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
膠孢Escherichia coli大鼠c-Jun基末端激(JNK)

塞氏檸檬桿菌Escherichia coli大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)

金色毛殼菌Escherichia coli大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)

青霉菌Escherichia coli大鼠二氧化(DAO)

稻生黃單胞菌Escherichia coli大鼠二氧化(DAO)

大麗花輪枝孢（棉花黃萎病菌）Escherichia coli大鼠褪黑(MT/MLT)

飲料  胭脂紅、檸檬黃、日落黃 Escherichia coli大鼠褪黑(MT/MLT)

釀酒酵母Escherichia coli大鼠成纖維生長因子10(FGF-10)

佛羅里達紅曲霉Escherichia coli大鼠成纖維生長因子10(FGF-10)

產(chǎn)氣腸桿菌Escherichia coli大鼠分泌型磷脂A2(sPLA2)

浸麻類芽孢桿菌Escherichia coli大鼠分泌型磷脂A2(sPLA2)

Pseudomonas defluviiEscherichia coli大鼠胞漿型磷脂A2(cPLA2)

醋醅類芽孢桿菌Escherichia coli大鼠胞漿型磷脂A2(cPLA2)

新月彎孢Escherichia coli大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)

銹赤蠟黃鏈霉菌Escherichia coli大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)

綠螺球菌Escherichia coli大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)

Nemo樣激抗體長極鏈格孢人急性T細胞白血病細胞

NDUFS2抗體小馬勃牛骨骼肌衛(wèi)星細胞

胰島原抗體純白環(huán)菇人臍靜脈細胞融合細胞

原蛋白轉(zhuǎn)化4抗體瓜鏈格孢梅花鹿干擾-γ單克抗體細胞
PI3K I型抑制劑（NVP-BGT226）枯草芽孢桿 補骨脂寧

熱帶假絲酵母 化鎂孔雀綠肉湯（MM，RV）

枯草芽孢桿 L-組鹽酸鹽

炭疽芽胞桿 亞桑那瓊脂（SA）

露濕擬漆斑 L-組

大球蓋菇 紫草酸

微球 亞硫酸鉍瓊脂（BS）

淡紫灰鏈霉 樟腦

膠凍樣類芽孢桿 SS瓊脂

金黃色葡萄球 月桂烯（香葉烯）

鮮綠青霉 羊藿

聚生殼 三糖鐵（TSI）瓊脂

水雷夫松氏 異戊二烯

冷溫木克酵母 膽硫乳瓊脂（DHL）

運動節(jié)桿 異皮啶