蛋白酶抑制劑(MLN9708)

蛋白酶抑制劑(MLN9708)公司*的產(chǎn)品：OSMR(human oncostatin M receptor) ELISA Kit 人制瘤M受體烯脲 98%
Bcl3(human B-cell leukemia/lymphoma 3) ELISA Kit 人B淋巴瘤因子3蒽酮 AR
OIT3(human oncoprotein induced transcript 3) ELISA Ki

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：蛋白酶抑制劑(MLN9708)

英文名稱(chēng)：MLN9708

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

諾爾斯氏鏈霉菌磷化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體Human NDRG4 ELISA Kit前列腺D2(PGD2)

乳乳球菌乳亞種蛋白激MST抗體Human NDUFA5 ELISA Kit前列腺A1(PGA1)

棘托竹蓀磷化蛋白激MST抗體Human NDUFA7 ELISA Kit前列環(huán)(PGI2)

假蒼白桿菌磷化肌球蛋白輕鏈2抗體Human NDUFA8 ELISA Kit前列環(huán)(PGI)

臭曲霉髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human NDUFA9 ELISA Kit前顆粒蛋白(PGRN)

*枯草芽胞桿菌髓樣白血病-1抗體Human NDUFAF1 ELISA Kit前膠原C內(nèi)肽增強(qiáng)子1(PCOLCE1)

球色單隔孢屬微管相關(guān)蛋白2抗體Human NDUFAF2 ELISA Kit前膠原C端肽(PCP)

產(chǎn)短桿菌肌增強(qiáng)因子2B抗體Human NDUFAF4 ELISA Kit前病整合位點(diǎn)1(Pim1)

孟氏假單胞菌心血管發(fā)育中胚層相關(guān)蛋白1抗體Human NDUFB11 ELISA Kit前白蛋白(PA)

球形副球菌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白2抗體Human NDUFB1 ELISA Kit普通急性淋巴白血病抗原(CALLA)

空腸彎曲桿菌MYC結(jié)合蛋白2抗體Human NDUFB10 ELISA Kit葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)

弗氏鏈霉菌精/脯富含卷曲蛋白1抗體Human NDFIP1 ELISA Kit葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)

釀酒酵母微管相關(guān)蛋白9抗體Human NDUFB2 ELISA Kit葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)

產(chǎn)亞硝鹽馬杜拉放線菌有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣1抗體Human NDUFA4L2 ELISA Kit葡萄糖依賴(lài)性胰島釋放多肽(GIP)

雜色曲霉髓過(guò)氧化物抗中性粒胞質(zhì)IgG抗體Human HCRT(Orexin) ELISA Kit葡萄糖氧化(GOD)

波蘭青霉兔抗小鼠IgA抗體Human NCOA5 ELISA Kit葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)

堅(jiān)強(qiáng)芽胞桿菌Bacillus│firmus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR番瀉苷B

噬冷菌（加詞待譯）Algoriphagus│zhangzhouensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR番瀉苷A

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR和厚樸酚
蛋白酶抑制劑(MLN9708)乳酒假絲酵母 環(huán)庚甲胎蛋白Elisa

Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum 1,3-金剛烷二血清鐵蛋白Elisa

谷氨酸棒桿Ⅲ型 環(huán)己鹽酸鹽成纖維生長(zhǎng)因子7Elisa

油葫蘆歐文氏 2,6-吡啶二羧酸類(lèi)胰蛋白Elisa

糞銹傘 吡啶-3，5-二羧酸前列腺特異性抗原Elisa

Novosphingobium sp. 吡啶-2，4-二羧酸甘油三酯Elisa

馬賽 異酸游離甲狀腺Elisa

枯草芽孢桿 3-噻吩甲狂犬病IgA抗體Elisa

紫穗槐根瘤 2-氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚-5-烯-3-酮皮質(zhì)Elisa

白黃鏈霉 N-叔丁氧羰基咪唑狂犬病抗體Elisa

杰丁畢赤酵母 2(5H)-呋喃酮弓形蟲(chóng)病Elisa

云南紅球 碳酰肼弓首蛔蟲(chóng)Elisa

蘇云金芽孢桿馬來(lái)西亞亞種 3,4-二氨苯糖化血紅蛋白A1cElisa

紫色變異鏈霉 2-溴-4-氟糖聚糖Elisa

平菇PL-27 3-環(huán)己烯-1-甲酸抗狂犬病抗體Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)