Bcr-Abl抑制劑(DCC-2036)

Bcr-Abl抑制劑(DCC-2036)公司*的產(chǎn)品：Phospho-PLK1 (Thr210)/FITC 熒光標(biāo)記化絲/蘇氨蛋白激Plk1抗體IgG
Podoplanin Protein/FITC 熒光標(biāo)記平足蛋白抗體IgG
Pokemon/FITC 熒光標(biāo)記兔抗撲克蒙抗體IgG
Polycystin 1/FITC 熒光標(biāo)記多囊腎蛋白1抗體IgG
Polycystin 2/FITC

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Bcr-Abl抑制劑(DCC-2036)

英文名稱：DCC-2036

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

秦氏蜜環(huán)菌Escherichia coli大鼠磷化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)

白靈側(cè)耳Escherichia coli大鼠核因子κB(NF-κB)

大腸埃希菌Escherichia coli大鼠核因子κB(NF-κB)

聚生殼菌Escherichia coli大鼠樹突狀表面特異性C型凝集-間黏附分子3結(jié)合整合分子(DC-SIGN/CD209)

米曲霉Escherichia coli大鼠樹突狀表面特異性C型凝集-間黏附分子3結(jié)合整合分子(DC-SIGN/CD209)

耐輻射薄層菌Escherichia coli大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)

鏈霉菌屬Escherichia coli大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)

瑞士乳桿菌Escherichia coli大鼠解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)

暗棕色桿菌屬Escherichia coli大鼠解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)

長(zhǎng)柄大環(huán)柄菇Escherichia coli大鼠c-fos

鞘單胞菌Escherichia coli大鼠c-fos

細(xì)疣籃狀菌Escherichia coli大鼠c-jun  

尖孢鐮孢Escherichia coli大鼠c-jun  

pCDNA3.1(+）Escherichia coli大鼠可溶性白介6受體(sIL-6R)

阿達(dá)青霉Escherichia coli大鼠可溶性白介6受體(sIL-6R)

釀酒酵母Escherichia coli大鼠吡啶(PYD)

蛋白激Ctheta抗體大青褶傘小鼠樹突狀細(xì)胞

半胱天冬-3原抗體圓孢蘑菇小鼠腎小球系膜細(xì)胞

蛋白磷2C亞型α抗體黑紅皮孔菌正常人食管鱗狀上皮細(xì)胞

蛋白酪磷1C抗體雅致栓孔菌人正常食管上皮細(xì)胞
Bcr-Abl抑制劑(DCC-2036)炭疽芽胞桿 營(yíng)養(yǎng)瓊脂（NA）

纖細(xì)雙歧桿 維生B3

克魯斯假絲酵母 營(yíng)養(yǎng)肉湯（NB）

構(gòu)巢曲霉 熊去氧膽酸

臭曲霉 新補(bǔ)骨脂異黃酮

丁香假單胞桿番茄致病變種* 改良磷酸鹽緩沖液PSB

松口蘑 L-纈

球黑孢霉 改良Y培養(yǎng)基

豐加鏈霉灰白亞種 腺苷

釀酒酵母 CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ)

生暗灰鏈霉 維生K1

沙福芽孢桿 維生E

芽胞桿屬 KF鏈球瓊脂

平菇 維生D3

金黃殼囊孢 乙基紫疊氮鈉肉湯