以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Raf激酶抑制劑(RAF709) | RAF709 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
RAF709是一種新型有效的Raf激酶抑制劑,詳細信息可參考WO2014151616A1中的化合物131,抑制c-Raf和b-Raf,IC50分別為0.5和1.8nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1628838-42-5 純度:99.55% 分子量:542.55 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
柱孢菌屬p27(抗原)Anti-GCHFR Antibody人肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)
Enterobacter sichuanensisP63 腫瘤抑制基因(抗原)Anti-GCLM Antibody人肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)
皺折裸胞殼護骨(多肽抗原)Anti-GCNT6 Antibody人幽門螺桿菌相關基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)
解淀粉芽孢桿菌骨保護蛋白配體(抗原)Anti-GDF15 Antibody人幽門螺桿菌相關基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)
蘇云金芽胞桿菌增生性瘢痕相關蛋白(抗原)Anti-GCNT7 Antibody人粘蛋白/粘液7(MUC7)
三葉草根瘤菌多腺苷二磷多聚抗原Anti-GDF1 Antibody人粘蛋白/粘液7(MUC7)
草假單胞菌內脂/內臟脂肪(人:N端多肽)、內臟脂肪、 又稱:前B克增強因子、內肥、腹脂Anti-GDF5 Antibody人轉谷酰2C多肽(TGM2)
灰色鏈霉菌內脂/內臟脂肪Anti-GDF3 Antibody人轉谷酰2C多肽(TGM2)
Streptomyces內脂/B克增強因子Anti-GDF6 Antibody人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)
蘋果黑腐皮殼菌色上皮源性因子(多肽抗原)Anti-GDF2 Antibody人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)
假單胞菌屬磷脂磷2C(抗原)Anti-GDF7 Antibody人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)
產凍膠菌腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽Anti-GDI1 Antibody人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)
出芽短梗霉一種腫瘤抑制基因抗原Anti-GFER Antibody人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
墳墓節(jié)桿菌孕激誘導阻斷因子(抗原)Anti-GDI2 Antibody人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
根瘤菌piwi 樣1蛋白(抗原)Anti-GFM2 Antibody人粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)
枯草芽孢桿菌過氧化活化增生受體γ(抗原)Anti-GGA1 Antibody人粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)
Saitohin蛋白抗體木霉屬人結腸癌細胞
線粒體琥珀脫氫D抗體蠟狀芽孢桿菌人回盲腸癌細胞
超氧化物歧化4抗體霍氏腸桿菌人慢性髓原白血病細胞
沉默調節(jié)相關蛋白6抗體大腸埃希氏菌人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞
Raf激酶抑制劑(RAF709)大豆慢生根瘤 對羥基
罕見沃特斯氏 3,4-乙烯二氧噻吩
柔嫩艾耳球蟲 滑石粉
梭屬 綠原酸
考克氏屬 8-羥基-7--5-喹啉磺酸
黑腐皮殼屬 N-羥基硫代琥珀酰亞
蘇云金芽孢桿 聚茴腦磺酸鈉
芽胞桿 聚對烯基茴香鈉
豇豆慢生根瘤 順烏頭酸
植物乳桿植物亞種 4-甲
表皮葡萄球 聚乙二350單甲
鏈霉 四丁基氟化三水合物
瑞士乳桿 胡椒堿
孟氏假單胞 高溫油脂III
糙皮側耳 棕櫚酸對酯