PKC抑制劑（NSC305787 hydrochloride）

PKC抑制劑（NSC305787 hydrochloride）公司正在出售的產(chǎn)品：OPGL/RANKL/CD254 /FITC 熒光標記骨保護蛋白配體抗體IgG AR,98.0%
RANK/TNFRSF11A/CD265/FITC 熒光標記核轉錄因子NF-κB受體抗體IgG高 AR
OPN/FITC 熒光標記骨橋蛋白抗體IgG偶氮胭脂紅B Biological stain
OPN/FITC

商品介紹：

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

黃色鐮孢人凝血原Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠apelin 12(AP12)

啤酒酵母菌人補體因子DBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠α干擾(IFN-α)

錦雞兒根瘤菌人血漿纖維連接蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠α干擾(IFN-α)

杰丁塞伯林德納氏酵母人纖維連接蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠激(PK)

人總蛋白SBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠激(PK)

橢園釀酒酵母人血清剝奪反應相關蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測

頂青霉防御1-3Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測

蘇云金芽孢桿菌人嗜性粒陽離子蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠腫瘤標志物(CA724)

裂蹄層孔菌人血漿抗凝蛋白SBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠腫瘤標志物(CA724)

枯草芽孢桿菌人血漿抗凝蛋白CBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠Ⅱ(FⅡ)

干酪乳桿菌人免疫球蛋白G Fc片段Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠Ⅱ(FⅡ)

仙芝人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)BBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠內(nèi)(ET)

意大青霉人C4結合蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠內(nèi)(ET)

抗輻射不動桿菌人補體片段3cBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠心鈉肽(ANP)

葉點霉屬人補體7Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠心鈉肽(ANP)

菅囊酵母人β淀粉樣蛋白1-42Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)

鋅指蛋白201抗體木耳小鼠胸腺上皮細胞

鋅指蛋白Zic2抗體黑芝貂肺上皮細胞

鋅指FYVE結構域蛋白27抗體香栓菌小鼠胰島內(nèi)皮細胞

鋅指蛋白423抗體榆生離褶傘SV40轉染人成骨細胞
PKC抑制劑（NSC305787 hydrochloride）米曲霉 紅四氮唑

釀酒酵母 酸性品紅

香菇 堿性品紅

華根霉 固紅GG鹽

核果鏈核盤 固紅RC

平田頭菇5-1 固紅TR半化鋅鹽

北方蜜環(huán) 固紅TR

靴狀 胭脂紅

西蕃蓮莖基腐病 紅鈉鹽

松口蘑 紅

朱紅栓 藏紅T

谷棒桿Ⅲ型 地衣紅

膠韌革 派洛寧B

麗水戴氏 派洛寧Y

大腸桿 變色酸二鈉鹽