商品介紹:
SGC2085是一種具有高效性和選擇性的CARM1抑制劑,IC50值為50nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1821908-48-8 純度:99.10% 分子量:312.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CARM1抑制劑(SGC2085)
英文名稱:SGC2085
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母人chemerinBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
植物乳桿菌人ⅫBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠性休克綜合征1(TSST-1)
黑根霉人ⅩⅢBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠性休克綜合征1(TSST-1)
小孢擬盤多毛孢人ⅢBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠環(huán)孢A(CsA)
肉桂色曲霉人補(bǔ)體1qBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠環(huán)孢A(CsA)
伏克盾殼霉人血小板膜糖蛋白ⅣBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)
芽殖酵母人α1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)
冷溫木克酵母人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠環(huán)孢A(CsA)
污水德沃斯氏菌人血小板堿性蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠環(huán)孢A(CsA)
聚生殼菌人類白抗原CBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠對(duì)基甲(PABA)
地衣芽孢桿菌人類白抗原EBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠對(duì)基甲(PABA)
香菇人類白抗原ABacillus subtilis subsp. subtilis小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)
厚環(huán)乳牛肝菌人血清淀粉樣蛋白PBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)
橄欖色毛殼人甘露糖凝集受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)
果生鏈核盤菌人纖溶/纖維蛋白溶Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)
暗孢節(jié)菱孢人B受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠T活化連接蛋白(LAT)
受精卵抑制蛋白1抗體大孔菌小鼠精母細(xì)胞
著絲粒ZW10相互作用蛋白1抗體松木層孔菌人包皮成纖維細(xì)胞
鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體假蜜環(huán)菌水貂肺上皮細(xì)胞
鋅指蛋白471抗體秀珍菇人永生化淋巴細(xì)胞
CARM1抑制劑(SGC2085)血鏈球 變色酸
沙雷氏屬 變色2R
傳染性法氏囊病病 黑色(溶)
蘇云金芽孢桿 黑色(水溶)
戊糖乳桿 蘇木
平菇 姬姆薩氏色
雙向伯克霍爾德氏 瑞氏色
萊比托游動(dòng)球 結(jié)晶紫
類干酪乳桿 葉綠A
東海產(chǎn)卟啉桿 葉綠B
蠟樣芽孢桿 葉綠銅鈉鹽
小被孢霉 鹽酸西替
平菇 馬來酸氟吡
玉米黑粉 磺舒
糞腸球 潘生丁