商品介紹:
GW7647是一種有效的PPARα激動(dòng)劑,對(duì)PPARα的EC50值為6nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):265129-71-3 純度:98.0% 分子量:502.75 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
D-松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Lactic acidE3泛蛋白連接EDD抗體包裝25g
DL-薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium citrate, tribasic胚胎外胚層發(fā)育蛋白EED抗體包裝5g
Euojaponine D英文名稱: CAS, Chrome azurol S轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體包裝25mg
Eupeasaponin I英文名稱: Cytidine-5'-triphosphate (CTP), disodium salt內(nèi)皮脂肪抗體包裝1g
Hederacolchiside A1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: CellulaseMYC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白1抗體包裝250mg
Hederacolchiside E英文名稱: Pyronin Y內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29抗體包裝100g
Hederagenin 3-O-α-L-rhamnop...英文名稱: Protamine sulfate from Salmom烯脂酰解抗體包裝5MG
Hyponine D英文名稱: BCIP, disodium salt磷化4E結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
Hyponine E英文名稱: Copper(II) acetate, hydrate三羥酰脫氫抗體包裝250mg
Indaconitine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Creatine phosphate限制過(guò)度增殖相關(guān)蛋白EML4抗體包裝100g
Karacoline英文名稱: Fructose 1,6-bisphosphate, 3sodium saltETS1相關(guān)蛋白2抗體包裝25g
L-薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fructose 1,6-bisphosphate,3sodium saltEFHA1蛋白抗體包裝5g
L-谷胱甘肽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Ammonium tartrate磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝1g
L-鼠李糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium carbonate, anhydrateEFHC1蛋白抗體包裝5g
L-細(xì)辛脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TaurineEFHC2蛋白抗體包裝25g
赭曲霉Aspergillus│ochraceus 質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)分髓過(guò)氧化物試劑盒Alpha-軟脂香樹(shù)精酯;alpha-
多食鞘桿菌Sphingobacterium│multivorum 質(zhì)量規(guī)格:>98%性鐵蛋白試劑盒日蟾它靈;Gamabufalin
美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定性神經(jīng)鞘磷脂試劑盒人參皂苷Ro;GinsenosideRo
PPARα激動(dòng)劑(GW7647)鋅指蛋白913抗體環(huán)阿屯 CYCLOARTENOL(P)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白450抗體環(huán)阿屯 CYCLOARTENOL(P)(REQUEST QUOTE)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白20D3抗體松馳 J CYTOCHALASIN J(RG)Human
鋅指蛋白BED3抗體S- 烯別半胱,蒜 CYSTEINE, S-ALLYL-L-(P)Human, Rat
鋅指蛋白ZBTB38抗體S- 烯別半胱,蒜 CYSTEINE, S-ALLYL-L-(P)Human, Mouse
鋅結(jié)合乙脫氫結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體S- 烯別半胱,蒜 CYSTEINE, S-ALLYL-L-(RG)Human, Mouse
鋅指蛋白ZBTB3抗體S- 烯別半胱,蒜 CYSTEINE, S-ALLYL-L-(RG)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白ZBBX抗體S- 烯別半胱,蒜 CYSTEINE, S-ALLYL-L-(RG)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白219抗體松馳 H CYTOCHALASIN H(RG)Human, Mouse, Rat