詳細介紹
商品介紹:
CAS號:108068-98-0 MDL號:None EINECS號:999-999-2 分子量:537.61 儲存條件:冷凍(-20℃) |
產品屬性:
英文名稱:KT-5720
產品規(guī)格:100μg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
雙芬雜質A (1-(2,6-二)-2-羥吲哚...英文名稱: Lamivudine雙氧化1/狀腺氧化1抗體包裝25g
雙嘧達莫(標準品)英文名稱: Lamivudine雙氧化2/狀腺氧化2抗體包裝5g
雙羥基奧沙利鉑(奧沙利鉑雜質III)(標準品)英文名稱: Trifluoperazine dihydrochloride雙氧化成熟因子抗體包裝25g
雙羥萘(標準品)英文名稱: Trifluoperazine dihydrochloride胞質分裂專一蛋白7抗體包裝5g
雙羥萘噻嘧啶(標準品)英文名稱: CorticosteroneDNA損傷誘導轉錄樣蛋白4抗體包裝100g
雙氫甘(標準品)英文名稱: Corticosterone死亡相關蛋白3抗體包裝25g
雙(標準品)英文名稱: Disulfiram防御α6抗體包裝1g
雙二環(huán)已烷鉑二硝鹽(奧沙利鉑雜質)(標準品)英文名稱: DisulfiramS期激活化蛋白DBF4B抗體包裝250mg
楊(標準品)英文名稱: Myricetin脫氧胞苷激抗體包裝25g
楊鎂(標準品)英文名稱: Myricetin短鏈脫氫還原3抗體包裝5g
楊片(不含楊對照品)英文名稱: Deoxycholic acidDNA聚合θ/DNA pol θ抗體包裝5g
楊酰(標準品)英文名稱: β-CyclodextrinDENN域內含蛋白2D抗體包裝10g
順鉑(標準品)英文名稱: Ramipril肌相關蛋白DAG1抗體包裝1g
司帕沙星(標準品)英文名稱: Ramipril磷化肌相關蛋白DAG1抗體包裝1g
司他夫定(標準品)英文名稱: *磷化形態(tài)發(fā)生紊亂關聯激活因子1抗體包裝5g
根霉Rhizopus│sp. 質量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于培養(yǎng)胃蛋白試劑盒L-絲;L-Serine
游海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│haloplanktis 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品胃癌抗原MG7-Ag ELISA KitL-蘇;L-Threonine
相思根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規(guī)格:>98%,USP,BR,可用于培養(yǎng)胃癌標志物ELISA Kit山椒子烯;Zeylenol
KT5720(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑小鼠可溶性血小板內皮粘附分子1檳榔(標準品)Human, Mouse
大鼠白介17檳榔花(標準品)Human
人抗糖蛋白抗體波棱瓜子(標準品)Human
大鼠白介1可溶性受體Ⅰ波棱Human
小鼠骨成型蛋白7博落回(標準品)Human, Mouse, Rat
人抗單核抗體薄荷(標準品)Human, Mouse, Rat
人氧化低密度脂蛋白抗體補骨脂(標準品)Human, Mouse, Rat
大鼠可溶性E選擇補骨脂定(標準品)Human, Mouse, Rat
小鼠透明質補骨脂二氫黃;補骨脂(標準品)Human, Mouse