過氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)

過氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)公司正在出售的產(chǎn)品：EGF-R/FITC 熒光標記表皮生長因子受體抗體IgG青霉V 分析標準品
EGFR/FITC 熒光標記表皮生長因子受體抗體IgG化苯汞 分析標準品
EGFRvIII/FITC 熒光標記表皮生長因子受體III型突變體抗體IgG腐霉利 分析標準品
EGFR/PE 熒光PE標記表皮生長因子受體抗體IgG二鹽 分析標準品
EGFR /Go

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
商陸皂苷T英文名稱： Esculin磷化肌球蛋白輕鏈抗體包裝5g

商陸皂苷(標準品)英文名稱： Fraxetin肌肉特異性泛蛋白連接1抗體包裝1g

商陸皂苷辛英文名稱： 6,7-Dihydroxycoumarin泛蛋白連接抗體包裝25g

芍藥苷（標準品）英文名稱： 6,7-Dihydroxycoumarin單羧轉(zhuǎn)運蛋白2抗體包裝5g

芍藥內(nèi)酯苷(標準品）英文名稱： Solanesol可溶性蘋果脫氫抗體包裝1g

蛇床子（標準品）英文名稱： Hesperitin蛋白激C亞性D型抗體包裝1g

蛇床子（標準品）英文名稱： Qingyangshengenin A磷化µ-型阿片受體抗體包裝5g

蛇膽汁（標準品）英文名稱： Qingyangshengenin B磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體包裝1g

射干（標準品）英文名稱： 4'-Demethylepipodophyllotoxin基質(zhì)金屬蛋白9抗體包裝250mg

麝香（標準品）英文名稱： Demethoxycurcumin染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體包裝1g

伸筋草（標準品）英文名稱： Norisoboldine單羧轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體包裝25g

腎茶（標準品）英文名稱： Dehydrodiisoeugenol線粒體核糖體蛋白L11抗體包裝5g

升麻（興安升麻）（標準品）英文名稱： Corynoxeine促血管平滑肌分化因子抗體包裝1g

升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷（標準品）英文名稱： Dehydrocostus Lactone跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體包裝250mg

升麻-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱： Genistin磷化致癌基因C-Myc抗體包裝5g

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：培養(yǎng)級，效價≥180IU/mg抗U1小核核糖核蛋白70kDa試劑盒對葉百部堿;Tuberostemonin

黃土根瘤菌Rhizobium│plateaum 質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%,藥用級抗TNF-α自身抗體東莨菪內(nèi)酯;Scopoletin

青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,CP抗SS-B/La抗體丁香;Syringic acid
過氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)泡囊側(cè)耳（鮑魚菇） 4-硝基-2H-1,2,3-三唑活性氧簇Elisa

串珠鐮孢 N-鄰苯二甲酰甘氨酸肌鈣蛋白ⅠElisa

紡錘形賴氨酸芽孢桿 5-硝基靛紅酸酐肌鈣蛋白TElisa

副豬嗜血桿 1,1'-雙(4-羥基苯基)環(huán)己烷;雙酚Z肌酐Elisa

棘孢小單胞 3-氨基-3-(4-甲氧基苯基)酸肌骨Elisa

盤長孢狀盤孢 4-甲基水楊酸甲酯肌紅蛋白Elisa

盤長孢狀盤孢 吡啶-3,4-二甲酸酐肌酸激Elisa

植物乳桿 N-Boc-4-氧代-L-脯氨酸心肌型肌酸激同工MBElisa

植物類諾卡氏 1-苯基-2-吡咯烷酮肌酸激同工MMElisa

短密青霉 1,3-二甲基-4-酮基質(zhì)金屬蛋白1Elisa

大腸埃希氏桿 3-（4-?；┧峄|(zhì)金屬蛋白13Elisa

香菇 3'--5'-氟苯乙酮基質(zhì)金屬蛋白2Elisa

擴散炭層 (5-溴-2-)(4-乙氧苯基)甲酮基質(zhì)金屬蛋白3Elisa

毛栓孔 5-溴-2--4'-乙氧基二苯基質(zhì)金屬蛋白4Elisa

泡囊短波單胞 3-甲基質(zhì)金屬蛋白9Elisa