商品介紹:
NVP-BAW2881(BAW2881)是有效,選擇性的VEGFR2抑制劑,IC50為值9nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:861875-60-7 別名:BAW2881 純度:98.05% 分子量:424.38 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
康唑(標準品)英文名稱: D(+)-Galactosamine hydrochlorideDNA基轉(zhuǎn)移3L抗體包裝25g
咯丁三(標準品)英文名稱: Dioscin二肽基肽10抗體包裝5g
洛芬(標準品)英文名稱: Dioscin二肽基肽3抗體包裝0.5mg
色林,凱他色林(標準品)英文名稱: DiosgeninDNA復制相關(guān)元件結(jié)合因子抗體包裝1g
舍林鹽(標準品)英文名稱: DiosgeninB淋巴轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白DRIL1抗體包裝250mg
頭孢芐(標準品)英文名稱: Naringenin轉(zhuǎn)錄共激活因子130抗體包裝1g
頭孢呋辛鈉(標準品)英文名稱: Naringenin核糖核3/Drosha抗體包裝5g
頭孢呋辛酯(標準品)英文名稱: Jatrorrhizine脫氧胸苷激DTYMK抗體包裝100g
頭孢克洛(標準品)英文名稱: Quercetin dihydrate雙特異性蛋白磷10抗體包裝25g
頭孢克肟(標準品)英文名稱: Quercetin雙特異性蛋白磷5抗體包裝500g
頭孢拉定(標準品)英文名稱: Tolvaptan磷化動力蛋白1抗體包裝1g
頭孢(標準品)英文名稱: Sulfathiazole動力蛋白1抗體包裝250mg
頭孢S異構(gòu)體(標準品)英文名稱: Sulfathiazole磷化動力蛋白1抗體包裝100mg
頭孢鈉(標準品)英文名稱: Cyclobenzaprine HCl腦啡肽A抗體包裝100mg
頭孢雜質(zhì)A(標準品)英文名稱: Medetomidine HCl強直性肌營養(yǎng)不良相關(guān)蛋白9抗體包裝1g
豬鏈球菌Streptococcus│suis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品維生D受體試劑盒三尖杉堿;Cephalotaxlen
球形芽孢桿菌Bacillus│sphaericus Meyer and Neide 質(zhì)量規(guī)格:>98%%,USP,BR維生D結(jié)合蛋白試劑盒三尖杉寧堿;Cephalomannine
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品維生D3試劑盒山麥冬皂苷B;Liriopesides
VEGFR2抑制劑(NVP-BAW2881)小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑千層紙A(標準品)Human, Mouse
人可溶性CD40配體千層紙A-7-0-β-D-葡萄糖苷(標準品)Human, Mouse
大鼠α葡萄糖苷千斤拔(標準品)Human
人可溶性CD30配體千金藤(標準品)Human
小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶千金子二萜二乙酰酰酯(標準品)Human, Mouse
大鼠破骨分化因子千金子L1(標準品)Human
大鼠Toll樣受體9千金子L2(標準品)Human, Mouse
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2千里光(標準品)Human, Mouse, Rat
人正常T表達和分泌因子千年健(標準品)Human